Chromatografické metody Zdeněk Glatz Podstata „Při chromatografii dochází k neustálému vytváření rovnovážných stavů separované látky mezi dvě fáze – stacionární a mobilní.“ Chromatografie • Mobilní fáze - kapalina – LC plyn – GC • Eluce - Izokratická – stejná eluční síla Gradientová – rostoucí eluční síla • Použití - analytická preparativní Kapalinová chromatografie LC| • Mobilní fáze - kapalina • Stacionární fáze - pevná fáze, kapalina Provedení LC • Papírová PC • Tenkovrstvá TLC • Kolonová CC Teorie „Ideální lineární chromatografie“ • Nekonečně rychlé ustavení rovnováh • Pístový tok mobilní fáze • Nulová difuse • Lineární sorpční isoterma Sloupcová hromatografie Charakteristiky chromatogramu Retenční – eluční čas t[r] • Doba od nástřiku vzorku po dosažení maxima eluční křuvky Mrtvý objem Kapacitní faktor k’ Selektivita Retenční faktor a Síly a efekty využívané při separaci • Iontové síly • Polární síly • Nepolární síly • Sterické interakce • Efekt velikosti molekul Rozdělovací chromatografie Rozdělovací chromatografie Adsorpční chromatografie Adsorpční chromatografie Adsorpční chromatografie • Stacionární fáze – polární Silikagel SiO[2] . n H[2]O Oxid hlinitý Al[2]O[3], AlO(OH), Al(OH)[3] [ ] Hydroxyapatit [Ca[5](PO[4])[3]OH] Adsorpční chromatografie • Mobilní fáze – nepolární • Eluce - zvyšováním polarity mobilní fáze Eluotropická řada: uhlovodíky