Molekulární biotechnologie
Č.1b


Jako donorový organismus v molekulární biotechnologii lze využít
•Jakýkoliv organismus (DNA), který má nějaký zajímavý gen
• uměle syntetizovaný gen

Příklad produkčních mikroorganismů v molekulární biotechnologii (Glick a spol.2006)



Prokaryontní a eukaryontní buňky (Glick a spol. 2006)
•.


Prokaryontní buňky
•Grampozitivní baktérie
•Gramnegativní baktérie
•Archea

Eukaryontní buňky
•Zástupci domény Eukarya


Gen, který chceme přenést z jednoho organismu do druhého
•Je fragment DNA
•U baktérií dlouhý asi 1000 -1200 bp (protein má 300-400 AK)
•Gen představuje asi 0.02% genomu bakteriální buňky (molekula DNA dlouhá několik milionů bp)
•
•
•

Hledaný gen bývá označován jako
•Cílová DNA (target) nebo
•Klonovaná DNA

Gen musíme z donorového organismu izolovat
•V dostatečném množství
•A přenést do recipientního organismu
•To nám umožňují techniky genových manipulací

Základní postupy technik genových manipulací
•Štěpení DNA restriktázami - izolace definovaných fragmentů DNA - genů
•Klonování tj. amplifikace fragmentů DNA (in vivo nebo později pomocí PCR in vitro)
•DNA/ DNA hybridizace
•Sekvencování – zjišťování primární struktury DNA
•DNA inženýrství – příprava modifikovaných verzí genů a transgenních organismů

Techniky genových manipulací
•Synonyma:
•genové klonování,
•genové inženýrství,
•genetické inženýrství,
•techniky nebo technologie rekombinantní DNA

Základní kroky při přenosu genů – schéma (Glick a spol. 2006)



•ChF 30.9.