01



02



03



04



06



08



07



09



10



11



12



13



14



15



16



17



18



19



20



21



22



23



10



11



24



26



•polynukleotid kináza: přenos g-fosfátu z ATP na 5‘-OH poly- nebo oligonukleotidu
•(fosforyluje kináza, ne fosforyláza!!)
•
•
•
•
•
•
•
•pokud chci značit 3‘-konec, tak DNA-polymerázou nebo terminální nukleotidyl trasferázou (TnT, TdT)
a radioaktivní fosfát musí být a!!
•TnT, TdT: připojování nukleotidů (deoxynukleotidů) na volný 3‘-OH konec bez templátu
C:\Documents and Settings\Biofyzikalni ustav\Plocha\ATP.png
a
b
g

•DNA ligáza: vytváří fosfodiesterové vazby, spojuje fragmenty DNA, zaceluje zlomy
•v prvním kroku přenos AMP z ATP nebo NAD na 5‘-fosfo konec (meziprodukt obsahuje „makroergickou“
disfosfátovou vazbu)
C:\Documents and Settings\Biofyzikalni ustav\Plocha\ligase.gif C:\Documents and
Settings\Biofyzikalni ustav\Plocha\ATP.png C:\Documents and Settings\Biofyzikalni
ustav\Plocha\NAD.png