Morfologie prokaryotických buněk a jejich kolonií
(první blok)
Vypracovala: Petra Szelcsányiová

Osnova:
1)Dokumentace
2)Barvící techniky
•Použité organismy:
a)Ancylobacter aquaticus CCM 2549
b)Escherichia coli CCM 3954
c)Leuconostoc mesenteroides CCM 1803
d)Lactobacilus delbrueckii subs. bulgaricus CCM 7190T
e)Haloferax mediterraneii CCM 3361T
f)
f)

1) Dokumentace
•Morfologie kolonií:
•pozorování pod binokulární lupou
•fotky pořízené digitálním fotoaparátem
•Morfologie buněk:
•pozorování preparátů v jasném poli použit badatelský mikroskop Olympus BX 50 RGB s videokamerou
Hitaschi •zpracování a analýza obrazu v programu LUCIA G 4.61

2) Barvící tecniky
•Gramovo barvení:
•Postup:
•-   připravený nátěr kultury na podložním sklíčku po zaschnutí fixujeme v plameni
-převrstvíme krystalovou violetí (pro tento účel 1 min)
-barvivo slijeme a opláchneme destil. vodou
-převrstvíme Lugolovým roztokem ( 30 s)
-barvivo slijeme, preparát opláchneme dest. vodou a odbarvujeme ethanolem po dobu 20 s
-opláchneme dest. vodou
-dobarvíme safraninem (1 min)
-preparát opláchneme dest. vodou a osušíme
-

2) Barvící techniky - pokračování
•Negativní barvení:
-Barvíme pozadí buňky, velikost buňky je zachovalá a nezkreslená
-Průkaz pouzder a slizu (Leuconostoc mesenteroides)
-Na všechny preparáty jsem použila barvení nigrosinem
•Postup:
•-    Kulturu bakterií suspendujeme v kapce dest. vody na podložním sklíčku
-Lehce promícháme a rovnoměrně rozetřeme pomocí dalšího podložního sklíčka
-Necháme zaschnout a pozorujeme
•
•
•

Ancylobacter aquaticus CCM 2549
•Morfologie kolonií:
-drobné
-bílé nepigmentující
•Doba kultivace :
•7 dní (u grama 5 dní)
•
Ancylobacter aquaticus CCM 2549

C:\Users\uzivatel\Desktop\cytologie a morf. cv.1-foto\gram\Ancylobacter aquaticus CCM 2549.jpg
C:\Users\uzivatel\Desktop\cytologie a morf. cv.1-foto\negativni\ancylobakter-negat 1.jpg

Ancylobacter aquaticus CCM 2549  - Gramovo barvení
Ancylobacter aquaticus CCM 2549 -  Negativní barvení
Morfologie buňky:
Gramovo barvení:
- gramnegativní zakřivené tyčky (rohlíčky, prstýnky)
- zelená šipka - tvar „prstýnků
- černá šipka – tvar „rohlíčků“
Negativní barvení
velikost buňky:
- šířka 0,42 um
- délka 1,41 um

Escherichia coli CCM 3954
•Morfologie kolonií:
-Bílé až nažloutlé
•Doba kultivace :
•24 hod.
Escherichia coli CCM 3954

Escherichia coli CCM 3954 – Gramovo barvení
Escherichia coli CCM 3954 – Negativní barvení
Morfologie buňky:
Gramovo barvení:
- gramnegativní rovné tyčky
Negativní barvení
velikost buňky:
- šířka 0,59 um
- délka 3,01 um

Leuconostoc mesenteroides CCM 1803
Morfologie kolonií:
- světlé až béžové kolonie
- lesklé
- pokryté  extracelulárném slizem
( produkce slizu zvýšena kultivací se sacharózou)
Doba kultivace:
2 dny- negativní
9 dní- gram
Leuconostoc mesenteroides CCM 1803

Leuconostoc mesenteroides CCM 1803- negativní barvení
Leuconostoc mesenteroides CCM 1803 – Gramovo barvení
Morfologie buňky:
Gramovo barvení:
- grampozitivní kokovité až oválné buňky (krátké řetízky)
- růžová šipka – dvojice
- oranžová šipka – čtveřice
- černá šipka – krátký řetízek
Negativní barvení
- můžeme pozorovat sliz v okolí buněk
velikost buňky:
- šířka 0,83 um
- délka 2,65 um

Lactobacilus delbrueckii subs. bulgaricus CCM 7190T
Morfologie a kultivace:
- kultivace ve vysokém sloupci M6 24 hodin
- grampozitivní krátké tyčky se zaoblenými konci
- často tvoří řetízky
Lactobacilus delbrueckii subs. bulgaricus CCM 7190T – Negativní barvení

Lactobacilus delbrueckii subs. bulgaricus CCM 7190T – Negativní barvení
velikost buňky:
šířka 0,84 um
délka 1,92 um

Haloferax mediterraneii CCM 3361T
-zástupce domény Archaea
-
Doba kultivace:
3-5 dní- negativní
10-12 dní- gram
Morfologie kolonií:
- světle růžový pigment (buňky obsahují bakterioruberiny a žluté pigmenty)
-rovné okraje
Haloferax mediterraneii CCM 3361T

Haloferax mediterraneii CCM 3361T- Gramovo barvení
Haloferax mediterraneii CCM 3361T – Negativní barvení
Morfologie buňky:
Gramovo barvení:
- buňky extrémně pleomorfní
- tyčky, ploché disky, pohárky
Negativní barvení
velikost buňky:
- šířka 0,67 um
- délka 1,38 um