Cytologie a morfologie bakterií - cvičení
Dušan Roll
Protokol č. 1

Použité mikroorganizmy
•Bacillus sphaericus CCM 1615
•Ancylobacter aquaticus CCM 2549
•Saccharomyces cerevisiae
•Streptococcus mutants CCM 7409T
•Leuconostoc mesenteroides ssp. mesenteroides CCM 1803
•

Použité metody
•     Grammovo barvení
•    - převrstvení krystalovou violetí (30 s)
•    - převrstvení Lugolovým roztokem (30 s)
•    - převrstvení etanolem (20 s)
•    - převrstvení safraninem (60 s)
•

•    Barvení nigrosinem
•
•    Vzorek suspendujeme v kapce vody na sklíčku, přidáme kapku nigrosinu. Rozmícháme a pomocí
druhého krycího sklíčka rozetřeme. Necháme uschnout. Nefixujeme.
•
•    Barvení Kongo-červení
•
•   Nefixovaný preparát připravímet v kapce kongo-červeni.
•   Usušíme na vzduchu, převrstvíme HCl, slijeme a
•   opláchneme destilovanou vodou. Barvíme metylenovou
•   modří 3 min, opláchneme destilovanou vodou,
•   usušíme.
•

•   Barvení pouzder
•
•    Do kapky destilované vody přeneseme malé množství kultury, promícháme a rozetřeme. Sušíme a
nefixujeme. Suchý preparát převrstvíme karbolfuchsinem (3 min.), opláchneme a negativně obarvíme
nigrosinem.
•

Gramovo barvení (Bacillus sphaericus)
roll_bacillus_sphaericus2.jpg


barvení nigrosinem (Bacillus sphaericus)
bacillus_sphaericus_neg_nig.jpg


 Makrofotografie,
morfogie kolonií


Ancylobacter aquaticus
stáří kultury: 7 dní
ancylobacter_aquaticusCCM2549_3.jpg
•
•Tvar kolonií:
• okrouhlý
•Okraje:
• rovné
•Profil:
• vypouklý
•Povrch:
• matný
•Barva:
• bílá
•
•

Bacillus sphaericus
stáří kultury: 7 dní
kultivační médium: MPA
bacillus_sphaericus.jpg
•Tvar kolonií:
• laločnatý
•Okraje:
• zvraštělé
•Profil:
• knoflíkovitý
•Povrch:
• lesklý
•Barva:
•krémová

Leuconostoc
mesenteroides
stáří kultury: 7 dní
kultivační médium: MRS
leuconostoc_mesenteroides_mesenteroidesCCM1803.jpg
•Tvar kolonií:
• okrouhlý
•Okraje:
• rovné
•Profil:
• vypouklý
•Povrch:
• lesklý
•Barva:
•béžová
•

Saccharomyces cerevisiae
stáří kultury: 7 dní
kultivační médium: MEA
Saccharomyces_cerevisiae_2.jpg
•Tvar kolonií:
• laločnatý
•Okraje:
• rovné
•Profil:
• vypouklý
•Povrch:
• lesklý
•Barva:
•krémová
•

Streptoccocus mutants
stáří kultury: 2 dny
médium: CHOC, 370C, CO2
streptococcus_mutants_CCM7409T.jpg
•Tvar kolonií:
•okrouhlý
•Okraje:
• rovné
•Profil:
•vypouklý
•Povrch:
• lesklý
•Barva:
•béžová
•

Mikrofotografie,
morfologie buněk


Ancylobacter aquaticus
(G-, rohlíčky), stáří kultury: 1 den
•Gramovo barvení
ancylobacter_aquaticus2.jpg
•Kongo-červeň barvení
ancylobacter_neg_kong.jpg

Ancylobacter aquaticus (barvení nigrosinem)
ancylobacter_neg_nigr2.jpg


Bacillus sphaericus
(G+, tyčky), stáří kultury: 2 dny
•Gramovo barvení
roll_bacillus_sphaericus2.jpg
•barvení nigrosinem
bacillus_sphaericus_neg_nig2.jpg

Leuconostoc mesenteroides
(G+, koky), stáří kultury: 2 dny
•Gramovo barvení
Leuconostos_mesenteroides_CCM1803_gram_pav.JPG
•barvení nigrosinem
leuconostoc_neg_nigr.jpg

Leuconostoc mesenteroides (barvení pouzder)
leuconostoc_mesenteroides_pouzdro_roll.jpg


Saccharomyces cerevisiae
stáří kultury: 2 dny
•Gramovo barvení
saccharomyces_cerevisiae_roll2.jpg
•barvení nigrosinem
sacvcharomyces_neg_nigr_vyrez.jpg

Srovnání velikosti kvasinky a bakteriální buňky
Gramovo barvení
saccharomyces_ancylobacter_roll.jpg

Srovnání velikosti kvasinky a bakteriální buňky
barvení nigrosinem
•Sachcaromyces cerevisiae
sacvcharomyces_neg_nigr_vyrez.jpg
•Leuconostoc mesenteroides
leuconostoc_neg_nigr.jpg

Streptococcus mutants
(G+, koky), stáří kultury: 2 dny
•Gramovo barvení
streptococcus_mutants_roll.jpg
•barvení nigrosinem
Streptococcus_mutans_CCM_7409T_neg.jpg