MODULARIZACE VÝUKY EVOLUČNÍ A EKOLOGICKÉ BIOLOGIE CZ.1.07/2.2.00/15.0204 MYXOZOA MICROSPORA Kmen MYXOZOA („myxosporidie“) (Říše Animalia) Øintercelulární paraziti, paraziti tkání, orgánových dutin Øpůvodně protozoární kmen zahrnující 2 třídy (Myxosporea a Actinosporea) Øod 80. let → obě třídy = 2 vývojové fáze jednoho organismu Ødříve spojováni s mikrosporidiemi v taxon Cnidospora pro přítomnost pólových váčků s vymrštitelným vláknem Øu myxozoí vlákna z pólových váčků neslouží k přenosu sporoplasmy, ale k přichycení k tělu hostitele! ØMyxozoa = Metazoa, nejpravděpodobněji příbuzní se žahavci (Cnidaria) → podobnost pólových váčků s knidocystami Ø Ø FIG_7 Vývoj myxozoí: A. Myxosporeová fáze – „myxosporidie“ v rybách (živí se osmotrofně a pinocytózou, některé fagocytózou) - málo patogenní, ale znehodnocení („ztekucení“) masa proteolytickými enzymy z myxosporidií po smrti hostitele -vznik mnohobuněčných spor (odolné, ve vodě řadu měsíců) - B. Actinosporeová fáze -„antinosporea“ = intercelulární paraziti střevního epitelu nebo coelomové dutiny bezobratlých (kroužkovců, polychét a sumýšovců) -mnohobuněčné spory s triradiální symetrií, 3-mi pólovými váčky a 3-mi chlopněmi stěny - - Nejvýraznějším životním stadiem myxozoí jsou spory myxosporeová spora v rybách v kroužkovcích v mechovkách dvě fáze stejného organizmu další fáze ??? malacosporeová spóra actinosporeová spora Myxozoa – morfologická variabilita spor Spora : - 2 až 7 chlopní („valvy“) - 1 – 7 pólových váčků → obsahují spirálovitě stočené vymrštitelné vlákno (lepivé, přichycení ke střevnímu epitelu hostitele) - sporoplasma (= zárodek) – buňka se 2 jádry + glykogenová vakuola („ jodová vakuola“; zásobní látka D-glykogén) - šev spojující 2 chlopně spory sporoplasma pólové váčky Způsoby vinutí pólového vlákna ůůůůůůůů ppppp tttttt Sporoplasmová buňka se sekundárními buňkami -nakažení ryby – spora actinosporového typu vznášející se ve vodě → vystřelení vlákna a přichycení k rybě (kůže, žábra, ústní dutina…) -uvolnění sporoplasmové buňky obsahující vnitřní buňky – proniknutí do tkání → cyklus vegetativní proliferace (výskyt drobných buněk typu „matrijoška“ – v 1 buňce je 1 nebo více buněk sekundárních a v těch další buňky terciární -prasknutím primární buňky → uvolnění sekundárních buněk – opakování cyklu → masy buněk zaplavující krevní oběh nebo tkáně hostitele -vznik mnohojaderných plasmodií obsahujících různý počet vegetativních a generativních jader -kolem generativních jader vznikají buňky jejichž množením a diferenciací vznikají spory Vývoj myxozoí během myxosporeové fáze FIG_7 Endogenní dělení, vznik útvarů „buňka v buňce“ (cell doublets) a buněčných komplexů LomDyk PL 27p Sphaerospora renicola extrasporogonické stadium v ledvinných kanálcích 1 primární buňka 2 sekundární buňka 3 terciární buňka 4 kvarterní buňka Endogenní dělení, vznik útvarů „buňka v buňce“ (cell doublets) a buněčných komplexů FIG_7 Různé typy plasmodií 5, 6 - Myxidium lieberkuehni 7, 8 - Sphaeromyxa sabrazesi 9, 10, 11 - Sinuolinea dimorpha 12-14 - Ceratomyxa drepanopsettae 15 - Sphaerospora irregularis 16 - Leptotheca simplex 17 - Ortholinea polymorpha 18 - Parvicapsula schulmani LomDyk PL 19p Příklady spor, SEM A - Myxobolus macrocapsularis B - Zschokkella nova C - Myxidium giardi D - Myxobolus sp. E - Chloromyxum cristatum F - Myxobolus sp. G - Myxobolus sp. H - Chloromyxum reticulatum I - C. reticulatum J - Chloromyxum thymalli LomDyk PL 23p Spory v nativním preparátu A - Sphaeromyxa magna, Triglops murai, B - Myxidium rhodei, Rutilus rutilus, C - Myxidium truttae, Salmo trutta D - Myxidium gadi, Melanogramus aeglefini E - Zschokkella nova, Rutilus rutilus F - Zschokkella sp., Gobio, gobio G - Zschokkella sp., Gadus morhua H - Sinuolinea sp., Myoxocephalus scorpius I - Myxoproteus sp., Rheinhardtius hippoglossoides J, K - Leptotheca x Ceratomyxa?, Sebastes marinus L - Auerbachia pulchra, Macrourus berglax, M - Ceratomyxa drepanopsettae, Rheinhardtius hippoglossoides N - Sphaerospora molnari, common carp, O - Sphaerospora galinae, Tinca tinca P, Q - Hoferellus carassii, C. auratus R, S - Chloromyxum cristatum, Hypophthalmus molitrix Třída Myxosporea Klasifikace „myxosporidií“ – založena na morfologii myxosporeových spor (nemusí být známy aktinosporeové spory) -2 skupiny: 1. Multivalvulida – stěna spory ze 3 a více chlopní, parazité mořských ryb 2. Bivalvulida – dvouchlopňové spory a většinou 2 (vzácně 1 nebo 4) pólové váčky - většina rodů ze sladkovodních a mořských ryb Myxidium lieberkuehni – 2 pólové váčky na protilehlých pólech spory, spory mají tvar vřetena, močový měchýř štik (málo patogenní) Sphaerospora – pólové váčky na jednom pólu spory, spory kulaté Sphaerospora renicola – významný parazit intenzivních chovů kapra (nekróza epitelu ledvinných kanálků, zánět plovacího měchýře Myxobolus -většina parazity tkání -během sporogonie → velká plasmodia → vznik většího množství spor uzavřených v pansporoblastech – spory (kulaté, oválné, vejčité až hruškovité) se 2 pólovými váčky na jednom pólu, sporoplasma – 2 jádra a většinou s glykogenovou vakuolou Myxobolus cyprini – infekce myocytů kaprovitých ryb Myxobolus (syn. Myxosoma) cerebralis -sporoplasma bez glykogenové vakuoly -způsobuje „vrtohlavost pstruhů“ – napadá hlavovou chrupavku mladých ryb, plasmodia destruují chrupavku enzymaticky a fagocytují chondrocyty -příznak onemocnění: zčernání ocásku, ryba se točí za ocasem → vyčerpání, deformace těla a úhyn -přenos přes nitěnky (po pozření spor z ryby → actinosporeové spory typu Triactinomyxon = infekční pro ryby) Myxobolus cerebralis spora Životní cyklus M. cerebralis: RYBA - ryba se nakazí plovoucí actinosporou (uvolněná z nitěnky) -při kontaktu spora vystřelí pólová vlákna → uchytí se na rybě (vystřelení vláken a uchycení je hostitelský specifické!) -sporoplasma proniká do kůže a z ní uvolněné buňky se množí v kůži a podkoží -buňky pronikají do nervové tkáně a putují po ní do hlavové chrupavky → enzymatická destrukce -po 2-3 měsících – tvorba spor myxosporeového typu NÍTĚNKA - nitěnka se nakazí myxosporou uvolněnou z uhynulé ryby - ve střevě se z myxospory uvolní zárodek → množí se v mezibuněčných prostorách → tvorba bezbičíkatých gamet – kopulace → tvorba actinospor – vyloučení ze zažívacího traktu živé nítěnky Myxobolus cerebralis F - mladý jedinec pstruha, zakřivení těla G - zralé spory, halo efekt naznačuje mukózní obal H - masivní časná plasmodia mezi oddíly chrupavky I - dvě ohniska pokročilých plasmodií ve chrupavce hlavy LomDyk PL 29ap Třída Malacosporea -paraziti tělní dutiny mechovek (Bryozoa) + další hostitel (?) -červovité útvary s malakosporeovými sporami (- měkké stěny, 4 pólové kapsule s vychlípitelnými vláknem, 2 sporoplasmy) v tělní dutině mechovek Červíkovité stadium se sporami Buddenbrockia spp. Tetracapsuloides spp. – zánět ledvin (nemoc PKD) lososovitých ryb Kmen MICROSPORA (Říše Fungi) Øorganismy historicky považované za prvoky, ale do říše Protozoa nepatří! Øobligátně intracelulární cizopasníci obratlovců i bezobratlých Øparazitují výlučně uvnitř buněk v téměř všech živočišných kmenech Øvysoká hostitelská specifita (zatím popsáno 1200 druhů) Øsekundární ztráta mitochondrií v důsledku parazitického způsobu života Øpůvodci oportunních parazitóz u člověka (imunodeficience, HIV ve stadiu AIDS) Životní cyklus mikrosporidií → 2 fáze: 1. Merogonie -zárodek (sporoplasma) je v podobě miniaturní buňky injikován do buňky hostitele – přežívá jako velmi malé buňky (meronti) rozmnožující se binárním dělením nebo rozpadem plasmodií na merozoity – opakování rozmnožovacího cyklu -merogoniální buňky mají místo mitochondrií mitosomy (= drobné váčky se 2-ma membránami), primitivní Golgiho aparát -hostitelská buňka není během merogonie poškozována (zvětšuje se v útvar „xenoma“) → mikrosporidie působí spíše jako vnitrobuněčný symbiont než parazitický organismus 2. Sporogonie - buňky mikrosporidií vytváří na povrchu elektrodenzní stěnu → sporont (stále pokračuje rozmnožování) → sporoblast (osamostatnění buněk) → z každé buňky parazita vzniká spora adaptovaná pro přenos infekce -hostitelská buňka je poškozována → váček s velkým množstvím spor Spora -oválně-vejčitého tvaru se stěnou z chitinu (zeslabená na vrcholu spory) -cytoplasma s jádrem a velkým množstvím ribosomů -vystřelovací aparát → 3 komponenty: a.pólové vlákno zakotvené k vnitřní straně stěny v místě apikálního ztenčení b.polaroplast (= bobtnací organela spory) – systém membránových cisteren obklopujících přímou část pólového vlákna c.zadní vakuola – zadní část spory fungující jako další bobtnací organela Microspora Funkce spory -po aktivaci spory vnějšími podmínkami → vymrštění pólového vlákna (přehrnutím naruby; 2 sekundy) a vytlačení obsahu spory vláknem ven bobtnacími tělesy -vystřelení spory – zvýšením osmotického tlaku uvnitř spory (= pronikání vody do spory) → spora praskne na vrcholu -sporoplasma mikrosporidie je injikována do cytoplasmy hostitelské buňky Šíření mikrosporidií uvnitř hostitele -mikrosporidie nejsou schopny pohybu, ale po infekci během 2 – 3 dnů vytváří generaci tenkostěnných spor → samovolně vystřelují v hostitelských buňkách (= primární spory; šíření infekce uvnitř hostitele!) -sekundární spory vycházejí s tělními exkrety nebo po smrti hostitele a kontaminativní cestou infikují dalšího hostitele - Rod Nosema Nosema apis - běžný parazit střevního epitelu včely medonosné (včelí úplavice) Nosema apis spory Nosema bombycis - parazit tkání housenek bource morušového (žloutenka bourců) - možný transovariální přenos - pěstování housenek ze snůšek z mikroskopicky kontrolovaných, zdravých samic (metla hedvábnictví) Nosema bombycis tmavé skvrny na housenkách HMYZ Nosema locustae -parazit sarančat -spory smíchané s návnadou → biologický boj proti sarančatům v USA - Rod Vairimorpha Vairimorpha necatrix - parazit tukového tělesa motýlů ČLOVĚK Rod Encephalitozoon – vývoj mikrosporidie ve velké vakuole v hostitelské buňce (parazitoforní vakuola – u mikrosporidií výjimečně. Encephalitozoon cuniculi - systémový parazit řady savců, celosvětové rozšíření - genotyp I = králík, genotyp II = pes, genotyp III = myš a pes - u člověka genotyp I, II a III - predilekční orgán: ledviny (roznos močí), mozek - králíci – v mozku a ledvinách → nervové poruchy, zaklánění hlavy, točení dokola - psi – bez klinických příznaků Encephalitozoon intestinalis - systémový parazit řady savců - predilekční orgán: střevo, ledviny Encephalitozoon hellem - systémový parazit řady ptáků (např. andulky) - u člověka – infekce obličejových dutin a dýchacích cest (méně často oka, ledvin a močových cest) - infekce sporami z prachu z trusu ptáků - Rod Enterocytozoon Enterocytozoon bieneusi - celosvětové rozšíření - epitel duodena a jejuna, žlučových cest - zoonotický charakter – výskyt u zvířat (pes, kočka, králík) - původce průjmového onemocnění, nejčastěji diagnostikovaná mikrosporidie při AIDS - 15% AIDS pacientů s průjmovým onemocněním, v Africe až - 35% HIV pozitivních pacientů - léčení není známo RYBY Rod Pleistophora - parazité rybích tkání (hlavně svalů) - Pleistophora hyphessobryconis - parazit svalů neonek (Hyphessobrycon spp.) - „neónová nemoc“ – bledá nepravidelně ohraničená místa na těle ryb, ztráta svítivého laterálního pruhu a deformace těla