Chlamydia antigen test

Rychlý test pro kvalitativní detekci antigenu chlamydií v cervikálním stěru žen, ve stěru z uretry
a vzorku moče u mužů

Charakteristika: Chlamydia trachomatis je nejběžnějším sexuálně přenosným mikroorganismem na světě
způsobující infekční pohlavní choroby. Vývojový cyklus chlamydií má tři stádia: elementární
tělíska-infekční forma, iniciální – vegetativní a neinfekční forma a intermediární – tvoří
přechodné stádium.  Infekce CH.t. může vykazovat jak vysokou prevalenci, tak bezpříznakový průběh
s častými vážnými komplikacemi u žen i následně u novorozenců. Komplikace chlamydiových infekcní u
žen zahrnují cervicitis, uretritis, endometritis, zánětlivá onemocnění pánve, zvýšenou incidenci
ektopických těhotenství a neplodnost. Vertikální přenos infekce z matky na novorozence během porodu
má za následek propuknutí konjunktivitidy nebo zápalu plic. U mužů se komplikace infekce chlamydií
projevují uretritidou a epididymitidou.  Až 40% negonokokových uretritid je způsobenou chlamydiovou
infekcí. Přibližně 70% endocervikálních infekcí u žen a až 50% mužů s uretrální infekcí probíhá bez
příznaků. Obvykle je chlamydiové infekce diagnostikována až detekcí chlamydiových uzavřených
tělísek ve vzorku buněk tkáně při cytologickém vyšetření. Stanovení kultivací je drahé a dlouhé.
Nejspecifičtější, ale drahou metodou je PCR. Test Chlamydia  Ag je rychlý test pro kvalitativní
detekci Ch. antigenu v uvedených biologických vzorcích. Výsledek se odečítá za 10minut. Test
využívá specifickou protilátku proti Ag CH. trachomatis pro průkaz antigenu.

Princip testu: Chlamydia test card je kvalitativní test na principu chromatografické imunoassay pro
detekci chlamydiového antigenu ve vzorcích cervikálních stěrů u žen a uretrálních stěrů nebo ranní
moče u mužů. Specifická protilátka proti chlamydiovému antigenu je navázána v lince v testovací
zóně. Během provedení testu antigen obsažený ve vzorku reaguje s protilátkou proti chlamydiím,
která je navázána v partikulích. Tato směs dále migruje chromatografickým papírem a reaguje
s protilátkou proti chlamydiím navázanou na membráně v oblasti označené T (test), kde vytvoří
barevnou linii. Pro kontrolu postupu je na testu ještě kontrolní linie, označená C. Zbarvené této
linie potvrzuje, že test byl proveden správně, nasákavost membrány je adekvátní a bylo aplikováno
dostatečné množství vzorku.

Vyhodnocení: Přítomnost barevné linie u T znamená pozitivní výsledek, zatímco nepřítomnost barevné
linie znamená negativní výsledek.

Odběr vzorku stěrem z cervixu: Použijte odběrový tampon, který je součástí souprav. Před odběrem
vzorku odstraňte hlen z oblasti cervixu bavlněným tamponem a znehodnoťte jej. To umožní získat
columnarních nebo cuboidalních epitelií, které jsou zásobárnou chlamydií. Otáčejte tamponem jedním
směrem o 360°, ponechejte v klidu 15 vteřin a potom vyjměte tampon. Přitom se vyvarujte kontaminaci
exocervikálními nebo vaginálními buňkami. Nenavlhčujte předem tampon fyziologickým roztokem! Tampon
vložte po odběru do extrakční zkumavky. V našem případě, abychom se vyhnuli poškození, bude stačit
výtěr z pochvy, samozřejmě se pak nedá zaručit správnost výsledku testu.

Odběr vzorku stěrem z uretry u mužů:  Pro odběr z uretry lze použít standardní dakronový tampon.
Nemočit nejméně jednu hodinu před odběrem. Vsuňte tampon do uretry na 2 až 4 cm, otočte jím o 360°
jedním směrem, ponechte 10 vteřin v klidu a tampon vyjměte. Po odběru tampon vložte do extrační
nádoby. Lze použít i ranní moč, ale ta se musí upravovat a centrifugovat při 3000 táčkách 15 min.

Postup testu po odběru vzorku:

1.      Testovací kazetu, vzorek i reagencie vytemperujte před použitím testu na pokojovou teplotu.

2.      Vyjměte test z obálky, a co nejdříve jej použijte

3.      Lahvičku s reagentem A podržte kolmo a nakapejte 5 velkých kapek do extrakční zkumavky.
Reagent A je bezbarvý roztok.

4.      Ihned vložte tampon na dno zkumavky a otáčejte jím 15x jedním směrem. Pak ponechte v klidu
stát 2 min.

5.      Naberte do pipetky reagent B po značku a přidejte ho do extrakční zkumavky. Roztok se
zakalí.

6.      Přitlačte tampon opět ke dni zkumavky a otáčejte jím 15x až se roztok vyčeří a získá slabě
nazelenalý nebo namodralý odstín. Jestliže je ve stěru krev, zbarvení může být nažloutlé až
nahnědlé. Ponechte stát 1 min.

7.      Přitlačte tampon proti stěně zkumavky a vyjměte jej. Snažte se přitom vymačkat co nejvíce
roztoku do zkumavky.

8.      Nasaďte na extrakční zkumavku kapací uzávěr.

9.      Položte testovací kazetu na rovnou suchou podložku a aplikujte 3 kapky roztoku z extrakční
do jamky pro vzorek, označené S, pak nastavte časoměřič. Při kapání zamezte vzniku bublin.

10.              Vyčkejte, až se vytvoří barevné linie v testovacím a kontrolním poli. Výsledek
odečtěte po 10 min (nejdéle však do 20 min).


Extrakční zkumavka obsahuje:

1.                  Odběrový tampon

2.                  Reagent A

3.                  Reagent B

4.                  Na extrakční zkum. nasadit kapací uzávěr

5.                  Nakapat z extrakční zkum. 3 kapky do vzorkové linie

Odběr z pochvy:

1.                  Bavlněným tamponem otřít vsup do pochvy

2.                  Odběrovým tamponem setřít vzorek- spíše nechat 15vteřin zasunutý do pochvy

3.                  Tampon vložit do extrakční zkumavky

Vyhodnocení:

Negativní nález: Jedna barevná linie v oblasti C, v oblasti T se linie nevytvořila.

Pozitivní nález:  Dvě barevné linie, jedna v oblasti T a jedna v oblasti C.

Neplatný nález: Chybí linie v oblasti C, pak je chyba v postupu nebo množství aplikovaného vzorku a
výsledek je nehodnotitelný (bez ohledu na vznik barevné linie v oblasti T). Doporučuje se zopakovat
test s novou kazetou.

Cervicitis – zánět děložního hrdla,

Uretritis – zánět močové trubice,

Endometritis – zánět dělohy

ektopických těhotenství – mimoděložní

epididymitida – zánět nadvarlete