Biokatalyzátory •Globulární bílkoviny – enzymy • •RNA - ribozymy table 5-2 part 1 table 5-2 part 2 table 6-2 table 6-1 part 1 table 6-1 part 2 table 6-1 part 3 table 6-1 part 4 Warburgův optický test „Lock and key“ model figure 5-09 figure 5-10 „Induced fit“ model „Transition state“ model figure 5-11 Aktivní místo •Efekt přiblížení – překryv orbitalů •Specifické mikroprostředí – pH, I, hydrofobita atd •Dehydratace •Koncentrační efekt - 105 •Vhodná orientace • • Aktivační energie • • • •Uvolněna při vazbě substrátu na enzym Mechanismus katalýzy •Acidobazická •Kovalentní •Kovovými ionty •Elektrostatická interakce •Proximitní a orientační •Přednostní vazbu přechodného komplexu Acidobazická Kovalentní Kovovými ionty Elektrostatickou interakcí Proximitní a orientační Přednostní vazbu přechodného komplexu Lysozym + Lysozym Lysozym Lysozym lysozyme figure 5-05 Ustálený stav E + S ES ↔ EP E + P ssgraph [USEMAP] figure 5-04 Stanovení Km a Vmax figure 5-03 unnumbered figure pg 142 table 5-3 table 5-4 figure 5-15b figure 5-15c figure 5-15d table 5-5 figure 5-18 figure 5-06 figure 5-07 Regulace koncentrací enzymu Operonový model Allosterie allosteric2 Allosterie allosteric figure 6-02 Allosterie Allosterický aktivátor an-allo-activator Allosterický inhibitor an-allo-inhibitor Symetrický model figure 6-05 Sekvenční model figure 6-06 Allosterie hemoglobinu Myoglobin Hem Vazba O2 na Hb Vazba O2 na Hb Hb versus Mb Solné můstky Solné můstky Solné můstky Bohrův effekt – vliv H+ a CO2 Bohrův effekt – vliv H+ a CO2 Bohrův effekt – vliv H+ a CO2 Bohrův effekt – vliv H+ a CO2 pro05-04 Vliv BPG Vliv BPG a nadmořská výška Vliv BPG a nadmořská výška Fetální versus normální Hb Fetální versus normální Hb figure 6-07 Regulace kovalentní modifikací glykogenfosforylasa Regulace kovalentní modifikací glykogenfosforylasa P P P P Regulace kovalentní modifikací figure 6-08 Regulace zpětnou vazbou Regulace Abzymy figure 6-11 Ribozymy – katalytická RNA 1989 Nobelova cena • •Altman (Yale University) ribonukleasa P • •Cech (University of Colorado) mRNA Ribonukleasa P figure 6-12 Autokatalytická mRNA Tetrahymena thermophila figure 6-13