G-proteiny - celková stimulace metabolismu NO jako hormon Nervový vzruch Vedení nervového vzruchu Synapse Imunochemie ZÁKLADNÍ ÚKOLY IMUNITNÍHO SYSTÉMU • •OBRANA PROTI PATOGENŮ • •ODSTRAŇOVÁNÍ ABNORMÁLNÍCH BUNĚK (NÁDOROVÝCH, POŠKOZENÝCH, INFIKOVANÝCH…) BUŇKY IMUNITNÍHO SYSTÉMU: RŮZNÉ TYPY BÍLÝCH KRVINEK (LEUKOCYTŮ): MONOCYTY, MAKROFÁGY, GRANULOCYTY, LYMFOCYTY… ZBRANĚ IMUNITNÍHO SYSTÉMU: Fagocyty (požírají mikroby) Komplement Protilátky NK-buňky (zabíjejí infikované a nádorové buňky) T-lymfocyty (několik typů) Imunitní odpověď •Buněčná imunita – T-lymfocyty • •Humorální imunita – B-lymfocyty • •Spuštěna interakcí s antigenem T- LYMFOCYTY: VZNIKAJÍ V BRZLÍKU (THYMU) ROZEZNÁVAJÍ HLAVNĚ FRAGMENTY (VNITROBUNĚČNÝCH) PROTEINŮ NA POVRCHU JINÝCH BUNĚK ÚČEL: DETEKCE BUNĚK INFIKOVANÝCH “SKRYTÝMI” INTRACELULÁRNÍMI PARAZITY (např. VIRY) T LYMFOCYTY: POMOCNÉ TYPU 1 (POMÁHAJÍ VYVOLÁVAT ZÁNĚT) POMOCNÉ TYPU 2 (POMÁHAJÍ JINÝM BUŇKÁM (B LYMFOCYTŮM) DĚLAT PROTILÁTKY) CYTOTOXICKÉ (ZABÍJEJÍ INFIKOVANÉ BUŇKY, ABY SE NESTALY ZDROJEM INFEKCE) T LYMFOCYTY: DŮLEŽITÉ FUNKČNÍ SUBPOPULACE Tsubsets helper TH B killer Funkce TC Funkce TH B- LYMFOCYTY: VZNIKAJÍ V KOSTNÍ DŘENI VYRÁBĚJÍ PROTILÁTKY (VĚTŠINOU ZA VYDATNÉ POMOCI T-LYMFOCYTŮ) VZNIK REPERTOÁRU B LYMFOCYTŮ Blymphocytes Antibody Buňka 2759 Antibody Buňka 2748 PROTILÁTKY: OBALÍ MIKROORGANISMY A ZNEMOŽNÍ JIM NASEDNOUT NA BUŇKY OBALENÉ MIKROORGANISMY JSOU „CHUTNĚJŠÍ“ PRO FAGOCYTY (POŽÍRAČE MIKROBŮ) Ab a protilátka Anti = proti (řecky) gen = od gegnomai tvořit Makromolekulární látky přirozeného nebo umělého původu, které organismus rozpozná jako cizí (nevlastní). Po vpravení do vhodného (komplementárního) organismu, antigeny stimulují tvorbu protilátek, lymfokinů, regulačních a výkonných T-lymfocytů, čímž se navodí imunitní odpověď. ANTIGENY ANTIGEN KOMPLETNÍ (funkční) IMUNOGEN NEKOMPLETNÍ HAPTÉN Antigen je většinou užíván ve významu kompletního antigenu IMUNOGEN IMUNOGENNOST SPECIFIČNOST IMUNOGENNOST schopnost vytvořit imunitní odpověď (vznik protilátky) SPECIFIČNOST schopnost reagovat s těmito protilátkami, jejichž tvorbu vyvolal. S jinými protilátkami nereaguje HAPTÉN nemůže vyvolat imunitní odpověď, ale může reagovat s těmito buňkami a protilátkami, které vznikly po interakci imunogenu s imunokomplementární buňkou. Haptén je součástí molekuly kompletního antigenu SLOŽENÍ IMUNOGENU: 1) MAKROMOLEKULÁRNÍ NOSIČ (carrier) 2) NÍZKOMOLEKULÁRNÍ DETERMINANTNÍ SKUPINY determinanty, epitofy schéma antigenu VLASTNOSTI IMUNOGENU FYZIKÁLNÍ CHEMICKÉ BIOLOGICKÉ IMUNOGENEM nemůže být jakákoliv látka STUPEŇ IMUNOGENNOSTI je závislý na genetické Odpovědnosti a zralosti zvířete, kterému se imunogen aplikuje. a) molekulová hmotnost b) rozpustnost c) elektrický náboj d) tvar molekuly FYZIKÁLNÍ VLASTNOSTI IMUNOGENU: PROTEINY, POLYPEPTIDY POLYSACHARIDY NUKLEOPROTEINY Čisté lipidy jsou zpravidla jen haptény, ale v komplexech s proteiny nebo polysacharidy se stávají dobrými imunogeny. Imunogenovou aktivitu mohou mít všechny biopolyméry, které jsou přítomné v živých systémech, ale i syntetické anebo polosyntetické (konjugované) antigeny. Schopnost vyvolat imunitní odpověď není stejně silná. Nejsilnější proteiny, potom polysacharidy a jejich komplexy. želatina (slabý imunogen) malý počet determinantních skupin albumin (silný imunogen) dostatečný počet determinatních skupin CHEMICKÉ VLASTNOSTI IMUNOGENU: IMUNOGEN REAKCE ANTIGENŮ IN VIVO IN VITRO IN VIVO REAKCE -prospěšná (vznik imunity) -škodlivá (imunopatologická) -indiferentní (neodpovídá) IN VITRO REAKCE jsou základem imunochemických metod Základem reakcí je vznik biospecifické vazby mezi vazebnými místy protilátky a determinantními skupinami antigenu za vzniku protilátkově-antigenních komplexů (imunokomplexů), při interakcích antigenu a protilátky se uplatňují stejné nekovalentní interakce jako např. enzym-substrát, hormon-receptor h. ROZDÍL: protilátky nemění strukturu antigenu irreverzibilně SÍLY, KTERÉ SE UPLATŇUJÍ PŘI VAZBĚ ANTIGENU S PROTILÁTKOU - VODÍKOVÉ VAZBY - NEPOLÁRNÍ HYDROBÓBNÍ INTERAKCE - COULOMBOVY SÍLY - VAN DER WAASOVY SÍLY - LONDONOVY DISPERZNÍ PŘITAŽLIVÉ SÍLY - STÉRICKÉ ODPUDIVÉ SÍLY vazby Ab-A Příprava polyklonálních protilátek Příprava monoklonálních protilátek Příprava monoklonálních protilátek Imunochemické metody Imunochemické metody