1 Časový plán Pokročilé biofyzikální přístupy v experimentální biologii Úterý Středa Čtvrtek Úvod organizace kurzu Anisotropie fluorescence přednáška Fluorescenční mikroskopie přednáška 9-13 1.Měření spektrálních charakteristik proteinů a DNA návod Skupina A Nanophotemeter 2.Stanovení koncentrace proteinů Bradfordové metodou návod Skupina B Spektrofotometr záměna skupin A a B na stanovištích 1 a 2 5. Příprava fluorescenčně značeného proteinu Skupina A, B návod 6. Předvedení měření anizotropie fluorescence Skupina A, B 9. Připrava mikroskopických preparátů na fluorescenční in situ hybridizaci (každý si připraví vlastní preparát) 10. Sledování připravených preparátů rostlin obsahujících GFP 11. Konfokální mikroskopie Skupina A, B oběd záměna skupin záměna skupin záměna skupin 14-17 3. Vliv pH a teploty na spektrální vlastnosti fluorescenčních sond návod Skupina C (3 účastníci) Fluorimetr Fmax4 4. Fluorescenční stanovení koncentrace DNA návod Skupina D (3 účastníci) SpectroVis záměna skupin C a D na stanovištích 3 a 4 7. Vizualizace makromolekul při horizontální elektroforetické separaci (EMSA) návod 8. Agarosová elektroforéza sledovaná v reálném čase Skupina C, D společně 12. Měření vlastní fluorescence aminokyselin a proteinů Skupina C návod 13. Stanovení koncentrace DNA a proteinu za použití komerčně dostupných kitů návod Skupina D Záměna skupin C a D na stanovištích 12 a 13