Speciální metody
Detekce oxidu dusnatého pomocí
ozonové chemiluminiscence
Jan Víteček, 29.11.2013
Oxid dusnatý
ON
0,14 nm
Plyn, Molekula obsahuje nepárový elektron 
radikálová povaha, vysoce reaktivníN O
Komplexy s
přechodnými kovy
Oxidace
ONO2
N2O3/
NO+ Nitrosační
reakce
Zásobní formy NOAktivace guanylátcyklázy
S-nitrososloučeninyNO2
-, NO3
-
Oxid dusnatý
Významná signální molekula u obratlovců
Kardiovaskulární
systém
•Relaxace hladkého
svalstva v cévních stěnách
•Regulace krevního tlaku a
průtoku krve
Imunitní systém
•Zabíjení patogenů
ve fagozómu
Nervový systém
•Neuromodulátor
ONO2
-
NO
O2
-˙+
Chemiluminiscenční stanovení
NO
NO + O3 O2 + NO2*
NO2* NO2
NO ve vydechovaném vzduchu
„on-line metoda“
 Tlakem řízený postup (restriktor zabezpečuje tlakový gradient a
konstantní rychlost výdechu)
 Průtokoměrem řízený postup
 Software umožňuje řízení experimentu podle standardů ATS
NO ve vydechovaném vzduchu
„off-line metoda“
 Sběr vzorků pro pozdější
zpracování
 Stabilita vzorků do 48 h
 Metoda v souladu s
doporučeními ATS
NO ve vydechovaném vzduchu
drobných živočichů
 Komůrka pro myši
Stanovení RSNO/NO2
-/NO3
- v
kapalných vzorcích
 Převedení těchto látek na
NO
RSNO: redukce/katalytic. rozklad
NO2
-: redukce iodidem
NO3
-: redukce VCl3/HCl (95°C)
 LOD 1 pmol
 Rozsah do cca 100 uM
 Software pro kalibraci a
automatické vyhodnocení
měření
Úprava vzorku před
měřením
 Deproteinizace
 Selektivní odstranění NO2
-
(RSNO)