20. Radionuklidy jako indikátory Indikátorová metoda spočívá v umělých změnách izotopového složení prvku – Þ říkáme, že prvek je označen radioaktivním izotopem (metoda značených atomů) Vztah izotopového indikátoru a zkoumaného procesu: 1. Sledování chování určité chemické látky – pak musí být chemická forma této látky a indikátoru stejné - sledování biochemických dějů vyžaduje značení sloučeniny na určitých místech v molekul - radioaktivními izotopy (specifické značení) nebo jde o obecné radioaktivní označení sloučeniny aspoň jedním radioaktivním atomem (nespecifické značení) 2. Radioaktivní nuklid slouží k označení určité látky v obecném smyslu - sledování proudění kapaliny Podmínka nutná: dostatečná počáteční aktivita značící látky A) Značené sloučeniny Izotopicky substituované sloučeniny (všechny molekuly jsou na určitém místě specificky značené) Př. 2-(^14C)-octová kyselina Izotopicky značené sloučeniny – směs normálních molekul s přirozeným izotopickým zastoupením a izotopicky substituovaných molekul (specificky značených) Př: 2-[^14C]-octová kyselina Příklady preparativních postupů:  RMgBr + ^14CO[2] ® R-^14COOMgBr ® (hydrolýza) R-^14COOH Ø zavádění tritia je založeno především o na adici ^3H[2] na dvojnou vazbu o pomocí redukujících tritidů LiAl^3H[4], NaB^3H[4] Ø značený chroman lze připravit ozařováním oxidu chromitého neutrony HCl OH^- ^50Cr[2]O[3](n,g)^ 51Cr[2]O[3 ]^51CrCl[3 ]^51CrO[4]^2- Další příklady značených sloučenin: Značení izotopickou výměnou Jde o přípravu značených sloučenin, kdy se mezi dvěma molekulami, z nichž je jedna značená, vyměňují dva izotopy téhož prvku (nejčastěji tritia) Provedení: kontakt sloučeniny s tritiovanou vodou Je nutné, aby vazba s vodíkem podléhala alespoň minimální disociaci. RO-^1H + ^3H^1HO RO-^3H + ^1H[2]O Biosyntetické metody Jednoduché značené látky se použijí k výživě rostlin nebo mikroorganismů a využije se jejich syntetických schopností ^14CO[2], ^3H[2]O, ^32PO[4]^3-, 35SO[4]^2- 21. Indikátory v chemii a biologii Ø Studium mechanismů chemických reakcí ClO[2]^- + HOCl ® Cl^- + HClO[3] (značení ^36Cl) Ø Studium metabolických přeměn Látka, jejíž metabolismus se zkoumá, se podá organismu ve značené podobě – pokud je předpokládaný metabolický produkt radioaktivní, pak je předpokládaný mechanismus metabolismu potvrzen. Ø Kombinace studia metabolických přeměn s autoradiografií Možné aplikace radioaktivních indikátorů - stanovení součinu rozpustnosti - rozpustnost kovů v roztavených solích - rozpustnost plynů v kapalinách - rozpustnost vody v org. rozpouštědlech o stanovení nízkých tenzí par málo těkavých látek o stanovení složení plynné a kapalné fáze při destilaci o stanovení velikosti povrchu sorbentu z množství adsorbovaného radioaktivního plynu o rozdělení látek (nejčastěji iontů kovů) mezi dvě nemísitelné kapaliny (kapalinová extrakce) nebo mezi roztok a ionex o vylučování kovů na elektrodách při elektrolýze o studium migrace částic v roztoku v elektrickém poli o sledování účinnosti praní tkanin pomocí značených povrchově aktivních komponent pracích prostředků 22. Indikátory v biologii Ø migrace drobnějších živočichů (mouchy, komáři) – larvy se nechávají líhnout v živném radioaktivním médiu – dospělí jedinci jsou pak radioaktivní Ø migrace větších živočichů (netopýři nesou pouzdra s nuklidem – lze je pak zjistit i přes skálu nebo ve škvírách) Ø studium přenosu potravin a živin uvnitř hmyzího společenství (včelí úl) Ø studium výživy rostlin (např. pomocí značeného fosfátu)- zjistí se jeho distribuce v rostlině, způsob jeho příjmu kořenovým systémem, zdroj fosforu z půdy apod. Ø molekulární biologie se bez indikátorů neobejde – studium dějů přenosu informací na molekulární úrovni, podstata dědičnosti, určení pořadí nukleotidů v nukleových kyselinách (tzv. sekvencování) aj. 23. Indikátory v lékařské diagnostice Radionuklidy se zpravidla získávají z radionuklidového generátoru Ø využívají se v nukleární medicíně k vyšetřování funkce a stavu různých orgánů Ø k diagnostickým účelům se dodávají radiofarmaka, která se do těla zpravidla vpravují intravenózně Ø radioaktivní látka se selektivně hromadí ve vyšetřovaném orgánu a registruje se záření, které z něj vychází Ø zjišťuje se lokalizace zhoubných nádorů Ø provádějí se i dynamická vyšetření (sleduje se časová závislost příjmu a vylučování radioaktivní látky) Detekce záření vně organismu vyžaduje, aby radioaktivní nuklid emitoval elektromagnetické záření (gama nebo rtg) Þ používají se pozitronické zářiče (pozitrony podléhají anihilaci) nebo zářiče b-/g, jaderné izomery nebo nuklidy podléhající EZ Þ nuklidy musí být krátkodobé a musí mít vhodnou (zpravidla nízkou) energii (snižuje se radiační zátěž organismu) Detekce záření se provádí zpravidla pomocí gamakamery 24. Indikátory v hydrologii Ø studium pohybu vody v různých přírodních systémech (studium podzemních vod – jejich stáří, rychlost a směr toku, vztahy mezi povrchovými a podzemními vodami, propustnost vrstev apod.) Ø používají se nuklidy kobaltu nebo chromu Ø velké zředění aktivity během hydrologického pokusu minimalizuje zavedení radioaktivity do životního prostředí 25. Indikátory v průmyslu