PRAVIDLA PRÁCE v Lab. ABVMK (J. Fajkus), odd. FGP, ÚExB, PřF MU; Výzk. skupina Molekulární komplexy chromatinu, CEITEC MU (J. Fajkus) 1) Příchod a odchod, přítomnost na pracovišti a práce v laboratořích * Zaměstnanci i studenti zapisují svůj příchod a odchod v docházkové knize. (Pozn. aby se nestávalo, že student sice nepracuje v laboratoři, ale je někde v budově (v počítačové učebně např.) a nikdo o něm neví, když opouští poslední člověk budovu. Když se odepíše poslední člověk z knihy u dveří, je naše oddělení považováno za prázdné a zkontrolované pro ostatní oddělení. * Vedoucí studentů (školitelé) jsou za své studenty přímo zodpovědní. * Má-li na pracovišti školitel cizojazyčné studenty, je povinen jim přeložit a vysvětlit všechna pravidla, na kterých se na našem pracovišti dohodneme a je zodpovědný za to, že je budou dodržovat. * Všichni studenti bakalářského a magisterského programu, a PGS studenti, kteří nemají alespoň částečný úvazek, se mohou pohybovat v laboratořích POUZE tehdy, když je PŘÍTOMEN někdo ze zaměstnanců. Pokud chtějí studenti zůstat na pracovišti déle než jejich školitel, mají povinnost si dopředu zjistit, kdo ze zaměstnanců bude přítomen a dohodnout se s ním. * Pokud tak nějaký student neučiní, je za něj zodpovědný jeho školitel a to i v čase, když jeho školitel odešel. Tzn. i když je náhodou na pracovišti přítomen jiný zaměstnanec, ale neví o přítomnosti cizího studenta, protože tento student se s ním přímo nedohodl že by chtěl zůstat déle, NENESE tento člověk žádnou zodpovědnost za "cizího" studenta. . * PO 17. HODINĚ platí povinnost po skončené práci zkontrolovat a zamykat laboratoř (pokud je zamčená, znamená to, že jsou v ní všechny přístroje vypnuté a zkontrolované uzavření oken). Šetříte tak hodně práce odcházejícím lidem v pozdních večerních hodinách. * Pokud bude někdo odcházet a zjistí, že nějaký přístroj (kromě inkubátorů a třepaček) je zapnutý, aniž by na něm byl kdokoli ZAPSANÝ V SEŠITĚ, ŽE BUDE PRACOVAT PŘES NOC, má právo tento přístroj VYPNOUT a vzorky ponechat svému osudu, protože se má zato, ŽE JSOU TO ZAPOMENUTÉ VZORKY. Nemusí složitě volat a snažit se takového člověka sehnat. * PŘI ODCHODU zkontrolovat všechny přístroje (zvláště vařič, míchačku, váhy, spektrák, zavřená okna…)..jako poslední odcházející jste za to zodpovědní. Rovněž uzamkněte dveře od koridoru. 2) POŘÁDEK v LABORATOŘICH+ OBECNÉ ZÁSADY · všichni jsou povinni udržovat pořádek na všech pracovních místech, která používají, zejména pak na tam, kde pracuje více lidí. · Pro umývání skla a drobných nástrojů (např. špachtle a lžíce na vážení) platí obecně, že se umývají nejprve vodovodní vodou (dle potřeby s přídavkem detergentu), oplachují vodovodní vodou a následně deionizovanou vodou (z rozvodu deioniz. vody). Většina lab. skla se umývá v myčce, toto sklo pouze vypláchněte vodovod. vodou (příp. s detergentem) od hrubých nečistot, zbytků agarózy apod., a plňte do myčky, resp. pokládejte na stůl na umytí. Popisky na skle VŽDY opláchněte etanolem · studenti jsou povinni pomáhat v hlavní laboratoři uklízet sklo, které použili, a doplňovat špičky (v laboratoři je veden rozpis) · o víkendu je každý sám zodpovědný za mytí skla v myčce LEDNICE · VŠE ve společných lednicích (elfo lab, hlavní labina), musí být popsané - co je to za roztok + (Jméno, datum)- DUSÍK každý sám kontroluje množství dusíku v lahvích, pokud je jedna láhev již prázdná, nahlásí tuto skutečnost laborantce TŘÍDĚNÍ ODPADU * špičky-pytlíky na stole * alobal-speciální sběrné nádoby na stolech * laboratorní odpad (papíry, misky,..) - do košů na lab. odpad * EtBr odpad - tekutý (pufry z elfo van)-vylévat do SPECIÁLNÍCH nádob v digestoři - gely - do speciální nádoby v elfo labině * organický (chloroform, fenol, ..) - ve velké labině jsou v digestoři nádoby na org. odpad * sklo, skl. střepy - speciální koš v elfo labině * VYLÉVÁNÍ PUFRŮ a jiných roztoků - pouze do CHEMICKÝCH výlevek (hluboké, kameninové) ŠPIČKY · pokud jste dobrali špičky, ODNESTE krabičku Janě na stůl a doneste novou do zásoby · pokud používáte špičky S FILTREM, OZNAČTE viditelně krabičku a ukliďte ji tak, aby si ji nikdo nespletl a zbytečně je nepoužíval místo obyčejných. · špičky s filtrem se nesmí používat na běžné pipetování vzorků-jsou jen na SPECIÁLNÍ pokusy a pipetování enzymů. Neplýtvejte s nimi, jsou hodně drahé. DÁVKOVACÍ PIPETY Studenti smějí používat pouze pipety určené k obecnému použití (3 sady ve velké laboratoři, 1 v elfo lab. a pipety ve flow-boxech). Pipety z flow-boxů nepřenášet ENZYMY, ROZTOKY, CHEMIKÁLIE · Popis roztoků: pokud je nějaký roztok či chemikálie: -popsaná JMÉNEM - je to jen popis, že ji člověk dělal a mohou ji použít i ostatní -pokud je na ní napsáno DON'T USE znamená to, že ji NIKDO nesmí použít bez svolení dané osoby * VŠECHNY ZÁSOBNÍ ENZYMY, ROZTOKY atd. MUSÍ být umístěny v hlavním mrazáku či lednici ve velké laboratoři. Výjimku tvoří případy, kdy existuje jen 1 uživatel – pak může enzym uskladnit separátně, vždy to však musí zapsat na lednici * NESMÍ se dělat ALIKVOTY z těchto enzymů a skladovat si je ve vlastních lednicích, s výjimkou alikvotů odebraných na bezprostředně prováděný experiment. * to platí i pro KITY, nesmíte si je schovávat ve svých laboratořích a nebo si dělat do vlastní ledničky odlévat zásobu z pufrů k daným kitům; jejich místo je v hlavní labině nad spektrákem DOCHÁZEJÍCÍ roztoky a chemikálie (jak z mrazáku, tak ze skříňky ve velké labině): * pokud je v krabičce několik posledních kusů obecně používaného roztoku IHNED napište Janě papírek na stůl, že je třeba ho dodělat * Jana dělá roztoky proto, aby byla jistota, že jsou opravdu v pořádku. Studenti smí používat základních roztoků, další pracovní roztoky si ale připravují sami, nemají právo úkolovat v tomto směru laborantky. Bc. a Mgr. STUDENTI mají naopak POVINNOST pomáhat Janě s naplňováním špiček a děláním roztoků a to nejméně JEDNOU MĚSÍČNĚ. * Návody na přístroje či příbalové letáky k chemikáliím by MĚLY být ve skříňce na chodbě -aby si je kdokoliv mohl kdokoliv přečíst. Návody k některým přístrojům najdete přímo u přístrojů. * Pokud vám přijde nová chemikálie u Jany je speciální sešit na BEZPEČNOSTNÍ LISTY. Kvůli kontrolám je nutné je mít uchované! * V hlavní labině je sešit, kde se MUSÍ ZAPISOVAT PRÁCE S GENETICKY MODIFIKOVANÝMI ORGANISMY. Jinak dostaneme pokutu. * Média po kultivaci GMO je nutné nejprve inaktivovat (10 min. s přídavkem SAVO), a pak teprve vylít do chem. výlevky. OBJEDNÁVKY abychom věděli, co vlastně máme za enzymy, chemikálie či kity, nebo které jsou již objednány, je zavedený SYSTÉM OBJEDNÁVÁNÍ. Na copy byla k tomu účelu zřízena složka OBJEDNÁVKY, kde lze podle skupin dohledat většinu objednaného materiálu 3) ELFO LABORATOŘ * uklízet průběžně nádobí z odkapávače, uklidit rovněž to, co není od vás. * týdenní úklid provést podle návodu na stěně * s rukavicemi od EtBr nesahat kromě van a dvířek LASu na nic jiného * pokud dochází pufry napište to Janě * pokud se zde budou povalovat neoznačené vzorky ve stojánku, má je každý právo vzít, vyhodit a stojánek použít (a to i když budou v ledničce) * dávejte alobal na zásobní lahve s chemikáliemi či válce, ve kterých se dělají roztoky-jinak se do nich zbytečně práší LAS · KLÁVESNICE musí být čistá, nedotýkat se jí v rukavicích od EtBr · používat VŽDY ochrannou folii při focení gelu, aby se nepoškrábala deska LASu · GEL s EtBr PŘENÁŠET vždy V MISCE S PE folií (nekapete EtBr na zem a misky se používají i na jiné věci než práci s EtBr) · po 17.00 LAS vypínejte, není li zapsaná rezervace HORIZONTÁLNÍ ELFO (agar) · dohoda je taková, že GELY NESMÍ ZŮSTÁVAT VE VANĚ víc jak 4 hodiny (aby byly volné pro ostatní) · nalité gely NEschovávejte do lednice v nalévacím nosiči (potřebují ho ostatní) · pufry z van vylévejte pouze do určených nádob, ne do chemických výlevek (obsahují EtBr) · pokud vám vyteče pufr z vany ven na stůl-okamžitě to utřete · nosiče na gely neumývejte EtOH- plexisklo může popraskat · neobracejte při sušení víka elfo van, lámou se tak dráty a ničí se tím kontakty VERTIKÁLNÍ ELFO (SDS-PAGE) · nenalévejte si spoustu skel do zásoby (pořád je jich nedostatek a navíc plesniví a odpadávají spacery od sklíček) · nalitá skla NESMĚJÍ být v lednici víc jak 10 dní stará jinak má každý právo je vyhodit) · musí být VŽDY POPSANÁ jménem a datem nalití · NESMĚJÍ se skladovat v jiné lednici než v elfo laboratoři a v izotopové laboratoři * rozbitá sklíčka zapsat na papír na ledničce (je to evidence abychom věděli, jestli je jich dostatek) DNA laddery · 1 rozdělaný se skladuje v lednici (nenechávejte ho povalovat se na stole!) · zásobní jsou v krabičce v mrazáku v elfo laboratoři · pokud vytahujete nový z mrazáku a ŘEDÍTE HO barvičkou NAPIŠTE na něj výslednou KONCENTRACI (je spousta lidí, kteří odečítají koncentraci svých vzorků z gelu a potřebují vědět kolik markeru nanesli) (vhodná je 100-250ng/ul..ale je to jedno, hlavně, když je jasná) · stačí 250ng-1ug DNA ladderu (zbytečně neplýtvejte) · pokud berete předposlední alikvot ze zásobní krabičky, objednejte nový, resp. nahlaste školiteli nebo seketářce objednávku PROTEIN MARKER · uchovává se pořád v MRAZÁKU ne v lednici, nepředehřívá se · zásobní jsou v krabičce · pokud berete předposlední zkumavku ze zásobní krabičky, řekněte to Marcele · stačí 5ul na gel (neplýtvejte 1 zkumavka stoji asi 1800Kč) DIGESTOŘ · kádinky se zbytky zatuhlých gelů vypláchněte v chemické výlevce a BEZ KOUSKŮ GELU je dejte do nádobí (zbytky gelů dělají velký problém v myčce) · PIPETY, kterými se pipetoval AA gel a mohl by zatuhnout v jejich špičce, se musí PROPLÁCHNOUT vodou (nestačí je jen do vody ponořit, protože v nich zbytek gelu zatuhne a můžou se vyhodit) · dbejte aby byla voda v zavařovačce na pipety KRABIČKY NA ŠPIČKY V ELFO LABORATOŘI SE NECHÁVAJÍ V ELFO A DOPLŇUJE JE SLUŽBA. Nepřenášejte krabičky špiček z elfo místnosti do jiných laboratoří 4) PŘÍSTROJE pro práci s přístroji musí být všichni řádně zaškoleni, pokud si nejste jisti, jak se daný přístroj používá, vždy se raději zeptejte svého školitele, nebo osoby zodpovědné · Před započetím práce se zapisovat VŽDY do sešitů vedle přístrojů. Pokud budete zapsaní v sešitě jako poslední, jste zodpovědní za to v jakém je přístroj stavu (tzn. když uvidíte někoho, že se nezapisuje do sešitů, upozorněte ho na to, jinak přidělává problém někomu jinému, možná právě vám. * Rezervace zapisujte rovněž do těchto sešitů, a navíc označte papírovou přílepkou na dotyčném přístroji. Papírové přílepky použijte rovněž tehdy, pokud chcete, aby přístroj zůstal zapnutý přes noc. * na přístrojích je zapsán člověk, který je za ně zodpovědný * lidé zodpovědní za jednotlivé přístroje NEMAJÍ povinnost sekterářce "pouze ohlašovat problém" a chtít aby zařídila opravu. Mají sami zodpovědnost za to kontaktovat servisní / dodavatelskou firmu a učinit kroky k co nejrychlejšímu uvedení přístroje zpět do provozu. * případné poruchy OKAMŽITĚ nahlásit příslušnému člověku závadu * kromě LASu a spektrofotometru VYPÍNAT všechny přístroje IHNED po použití * pokud před vámi někdo nechal přístroj v nepořádku, napište to do sešitu - jinak to bude na vás * po 16.00 vypínejte všechny přístroje, které najdete zapnuté (kromě inkubátorů a třepaček), pokud není v sešitu záznam o tom, že je někdo používá. CENTRIFUGY * pokud vám něco vyteče do prostoru centrifugační vany, musíte to VYTŘÍT (pokud nevíte jak, kontaktujte osobu uvedenou v sešitě) * Pokud při centrifugaci dojde ke znečištění rotoru, musíte jej VYPLÁCHNOUT jarovou vodou, následně deioniz. vodou, a nechat vyschnout na filtr. papiře nebo papírové vatě. * po centrifugaci VŽDY VYJMĚTE ROTOR a odložte ho na určené místo * pokud dotočíte a zůstává námraza na stěnách, NECHTE ctfg OTEVŘENOU aby mohla vyschnout a až námraza rozmrzne, tak ji přijďte ZA CHVÍLI utřít. * pokud přijdete ke znečištěné centrifuze, takto napište do sešitu a kontaktujte člověka, který ji před vámi znečistil. * VYVAŽUJTE všechny vzorky před ctfg, jinak hrozí havárie a zničení centrifugy * rotory se NESMÍ pokládat přímo na desku laboratorního stolu, VŽDY ho položte na měkkou podložku – např. papírovou vatu - (rotory mají na sobě zespodu čidla, která se mohou poničit) TŘEPAČKY * pokud se vám něco vylije na plochu třepačky UTŘETE to po sobě (H2O, EtOH) * pokud se vylije něco do VODNÍ třepačky, musíte ji celou vyčistit (vylít vodu a nalít novou - deionizovanou) * pokud přijdete ke znečištěné třepačce, požadujte její vyčištění od předchozího uživatele * pokud budete poslední napsaní v sešitě, jste zodpovědní za to v jakém je třepačka stavu (tzn. když uvidíte někoho, že se nezapisuje do sešitů, upozorněte ho na to, jinak přidělává problém někomu jinému) SPEKTROFOTOMETR * vyplachujte po sobě pořádně kyvety (voda, EtOH), je k tomu i proplachovačka na vakuum, takže to není takový problém. * S kyvetami zacházejte opatrně, jejich ceny se pohybují nad hranicí 10 000 Kč/ks. * nenechávejte zbytečně zapnutou UV lampu, má omezenou životnost, takže jakmile doměříte a nevíte o tom, že chvíli po vás někdo půjde měřit, přístroj vypněte. CYKLERY * Peltieruv článek má taky jen omezenou životnost, proto pokud na konci svých PCR zařazujete dlouhodobé chlazení, nezadávejte 4°C ale stačí 10°C. Amplifikovaná DNA to v pohodě vydrží a PCR mašina není tak namáhaná, jako když musí celou noc chladit na 4°C * pokud odcházíte dřív a vaše PCR má doběhnout před 18.00 hodinou, zkuste kontaktovat někoho, aby vám vytáhl vzorky z cykleru a dal je do ledničky, aby mohl být cyklér vypnut. * pokud se budou neoznačené vzorky povalovat kolem cykleru budou vyhozeny FLOW-BOXY * musí po vás zůstat ABSOLUTNĚ čisté (vytřete vodou a EtOH) (neutírejte EtOH přední plexisklo-při zapnutí UV lampy by mohlo popraskat) * zapněte vždy UV a vylepte lísteček, že bylo zapnuté * u malého stolního flow-boxu se UV samo nevypne * pokud odcházíte DOPLŇTE špičky nebo jiné vybavení daného flow-boxu (aspoň se to vysterilizuje) * vyneste odpad * po skončené práci VYPÍNEJTE kahan též mechanicky a uzavřete přívod plynu ve flowboxu. Závěrečná ustanovení * všechna pravidla platí do té doby, než bude provedena a schválena jejich event. změna vedoucím pracoviště.