Fázový kontrast
metoda pro pozorování živých,
nebarvených objektů
Význam fázového kontrastu
• objekty amplitudové = barevné nebo nabarvené –
větší nebo menší měrou absorbují světlo = mění
amplitudu procházejícího vlnění
• objekty fázové = od svého okolí se liší jen malou
změnou indexu lomu = nemění amplitudu vlnění, ale
posunují jeho fázi
• lidské oko není citlivé na posun fáze
• fázový kontrast přeměňuje fázové posuny vlnění
na změnu amplitudy a umožňuje tak pozorování
živých nebarvených objektů
Fritz Zernike – holandský fyzik
nositel Nobelovy ceny za fyziku v roce 1953
• Formuloval zásady fázového kontrastu
• Poprvé je publikoval v roce 1935
• Podle jeho patentu byl v roce 1941
vyroben prototyp ve firmě Zeiss Jena.
• Od roku 1945 se toto zařízení začalo
sériově vyrábět a získalo si mnoho
uživatelů.
• Léta 1948 – 1955 byla obdobím
největšího rozkvětu aplikací fázově –
kontrastní mikroskopie, především v
biologii. 1888 – 1966
Souprava pro fázový kontrast
fázové objektivy
s fázovou deskou
Phz
pomocný
mikroskop
pro
centrování
clony a
fázové desky
fázový kondenzor s prstencovými clonami
Schéma fázového objektivu
dielektrická látka
(MgF2)
stínící
vrstva
(Al, Cr)lepící vrstva
fázový prstenec
čočky objektivu
Schéma fázového kontrastu podle
Zernikeho
prstencovitá clona fázová deska v objektivu
kondenzorsvětelný zdroj
s kolektorem a
kolekt. clonou
objektiv
Pluta (1982)
Schéma fázového kontrastu podle
Zernikeho
http://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.html
Konfigurace fázového mikroskopu
http://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.html
Centrování obrazu clony a fázového
prstence v objektivu
zaostření
pomocného
mikroskopu
http://www.microscope-microscope.org/advanced/phase-contrast-microscope.htm
Srovnání obrazu preparátu
epiteliálních buněk sliznice
http://www.microscope-microscope.org/advanced/phase-contrast-microscope.htm
ve fázovém kontrastuv procházejícím světle
Srovnání obrazu projasněného semene
Capsella bursa-pastoris
ve fázovém kontrastupři šikmém osvětlení
Srovnání obrazu epidermis cibule
ve fázovém kontrastuv procházejícím světle
Odkazy na zajímavé stránky
http://kfrserver.natur.cuni.cz/studium/prednasky/mikro/mscope/DIC/fk.htm
stránky kurzu Botanická mikrotechnika, Katedra fyziologie rostlin,
Přírodovědecká fakulta, UK, Praha
http://www.microscope-microscope.org/advanced/phase-contrast-microscope.htm
http://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.html
http://en.wikipedia.org/wiki/Phase_contrast_microscopy