Struktura a vývoj embrya krytosemenných rostlin ● ●modelový druh: kokoška pastuší tobolka (Capsella bursa-pastoris), č. Brassicaceae ● ●projasňovací médium: roztok chloralhydrátu ● ●cf. řezové preparáty, roztlakové preparáty ● ● 800px-Ovule-Gymno-Angio-en_svg Megasporogeneze (syn. makrosporogeneze) = tvorba megaspor (v nucelu) Megasporogeneze (syn. makrosporogeneze) tvorba megaspor (v nucelu) samičí archespor megasporocyt (mateřská buňka megaspor) tetráda haploidních megaspor Meióza I,II https://cs.wikipedia.org/wiki/Gametofyt https://cs.wikipedia.org/wiki/Megagametofyt https://en.wikipedia.org/wiki/Ovule https://cs.wikipedia.org/wiki/Vaj%C3%AD%C4%8Dko https://en.wikipedia.org/wiki/Integument Megagametogeneze = tvorba zárodečného vaku (v nucelu ve vajíčku) tetráda haploidních megaspor fungující megaspora (megaspory) mladý zárodečný vak zralý zárodečný vak = samičí gametofyt monosporický, bisporický, tetrasporický 3 mitotická dělení diferenciace buněk Bioassays 28:1067–1071, 2006 Zárodečný vak typu Polygonum Základní typy vajíček Goebel 1933 ortotropní (atropní) anatropní přímé obrácené příčné hemitropní kampylotropní amfitropní Obrázek1 ● Modellreihe_von_Grundformen_der_Samenanlagen_-Brendel_Nr__164-166- Models of different ovules, Botanical Museum Greifswald, Germany https://en.wikipedia.org/wiki/Ovule Anatropní vajíčko - schéma funiculus chaláza Embryogeneze = vývoj embrya Rostlinné embryo je charakterizováno svým původem, morfologií a vývojem v čase. Původ: zygotická embrya vznikají ze zygoty, která je výsledkem fůze gametických buněk; somatická embrya (syn. asexuální embrya, adventivní embrya, embryoidy) se vyvíjejí ze somatických buněk Morfologie: plně vyvinuté embryo je bipolární struktura s apikálním meristémem prýtu na jednom konci a apikálním meristémem kořene na konci druhém; dále je charakterizováno specifickým typem listů, tzv. dělohami. Vývoj embrya v čase je charakterizován sledem typických morfologických stadií zygota lineární embryo globulární embryo srdcovité embryo hruškovité (torpédovité) („téměř zralé embryo“) zralé embryo zygote linear stage embryo globular stage embryo heart-stage embryo torpedo-stage embryo walking stick-stage embryo mature (U-shaped) embryo Stadia vývoje embrya Capsella Erdelská 1981 globulární embryo torpédovité embryo Capsella bursa-pastoris – vývojová stadia embrya starší torpédovité embryo zralé embryo http://botit.botany.wisc.edu Embryogeneze Capsella 1.materiál: různě staré šešulky kokošky 2.preparace semen do nasyceného roztoku chloralhydrátu 3.pozorování: • v procházejícím světle (technika světlého pole) – zaclonit aperturní clonu!!! • při šikmém osvětlení • ve fázovém kontrastu • při Nomarského diferenciálním interferenčním kontrastu Literatura: Braune W., Leman, A., Taubert H. Pflanzenanatomisches Praktikum II. 2. vyd. Jena: VEB Gustav Fischer Verlag, 1982. Lux A., Erdelská O. et al. Praktikum z anatómie a embryológie rastlín, UK Bratislava, 1998. Embryogeneze Arabidopsis – Nomarski DIC DM Vernon and D Meinke (1994) Dev. Biol. 165: 566-573. Photos by DM Vernon 1 preglobulární 2 globulární 3 srdcovité 4 torpédovité 1 2 3 4 ● globulární embryo, technika světlého pole (bright field microscopy) ● srdcovité embryo, technika světlého pole (bright field microscopy) ● srdcovité embryo, fázový kontrast (phase contrast) ● torpédovité embryo, fázový kontrast (phase contrast) ● torpédovité embryo, fázový kontrast (phase contrast) téměř zralé embryo, technika fázového kontrastu f – poutko (funiculus) bc – bazální buňka (basal cell) chal - chaláza (chalase) cot – děloha (cotyledon) en – endosperm (endosperm) hy – hypokotyl (hypocotyl) sco – osemení, testa (seed coat, testa) ram – apikální meristém kořene (root apical meristem) v radikule (radicle) rc – kořenová čepička (root cap) sam – apikální meristém prýtu (shoot apical meristem) Mikrofotografie a jejich úpravy ●ALTERNATIVNĚ K RUČNÍM KRESBÁM možnost vypracovávat další protokoly pomocí digitálních mikrofotografií ●pokud do protokolu vypracovaného z digitálních mikrofotografií použijete snímek někoho jiného (pokud se vám daný objekt nepovedlo dobře zpracovat), uvedete v protokolu autora preparátu a úpravu a popis snímku uděláte sami (nebudete tedy od kolegů přebírat již popsané snímky) ● ●nehledě na formu protokolu (z mikrofotografií či kreslené), každý student předloží v každém cvičení k mikrofotografické dokumentaci všechny své (kvalitativně dobré) preparáty Mikrofotografie a jejich úpravy ●předávání fotografií přes úschovnu v ISu ●on-line free editační software http://apps.pixlr.com/editor/ pixlr.com – doporučený postup editace ●v případě potřeby obrázek vhodně otočte (nabídka Obrázek, Otočit plátno…), popřípadě ořízněte (nabídka Obrázek, Ořez…) ●Obrázek převzorkujte na menší velikost (nabídka Obrázek, Velikost obrázku, zadejte šířku 1600 px a nechte zaškrtnutou volbu Omezit proporce) ●vhodné je po převzorkování na menší rozlišení doostřit (Filtr, Zostření) pixlr.com – doporučený postup editace ●Zvětšit zobrazení můžete pomocí CTRL + (+), zmenšit pomocí CTRL + (-) ●větší struktury popisujte přímo, zvolte vhodnou barvu a font velikosti 40 ● pixlr.com – doporučený postup editace ●vložené popisy se vkládají do nových vrstev; pokud je potřebujete přesunout, přepněte se do příslušné vrstvy a použijte nástroj pro posunutí pixlr.com – doporučený postup editace ●pro popis malých struktur použijte šipku; najdete ji jako soubor Arrows.pxd ve studijních materiálech ke kurzu v ISu; obrázek si zvětšete (CTRL + (+)), pomocí nástroje snímací tužka s nastavením tolerance 150 klikněte do středu šipky na žlutou barvu; výběr si zkopírujte pomocí CTRL + (c), do mikrofotografie jej vložte pomocí CTRL + (v). pixlr.com – doporučený postup editace ●výsledný obrázek může vypadat např. takto (používejte seznam zkratek, který jste dostali první cvičení): ● ● ● ● ● ●uložte jej jako JPG DSC01301_new pixlr.com – doporučený postup editace ● ●Další zpracování protokolu – Word, HTML… ●Formálně stejné jako při ručně kreslených protokolech! –nadpis cvičení, jméno, kompletní popis preparátu (typ objektu, rostlinný druh…)