• Mikroskopické houby – rod Penicillium • MASARYKOVA UNIVERZITA • PŘÍRODOVĚDECKÁ FAKULTA • ÚSTAV EXPERIMENTÁLNÍ BIOLOGIE • • http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/images/plisne/mikro/Penicillium%20chrysoge num%20CCF%202878%20mikro.jpg http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/images/plisne/mikro/Penicillium%20roquefor ti%20CCF%202310%20mikro.jpg http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/images/plisne/mikro/ • • • • •Penicillium •Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Eurotiomycetes, Eurotiomycetidae, Eurotiales, Trichocomaceae * cca 352 druhů * výskyt: půda, ovzduší, častý kontaminant potravin a krmiv (P. italicum a P. digitatum na citrusových plodech) * producent mykotoxinů a mnoha dalších extrolitů * alergenní * Penicillium marneffei – klinicky významný druh * využití: startovací kultury k výrobě sýrů (P. camemberti syn. P. candidum, P. roqueforti), výroba antibiotika penicilínu, P. nalgiovense – fermentované uzeniny • http://shop.homecheesemaking.com.au/white-mould-spores-penicillium-candidum-the-culture-that-produc es-the-white-coating-in-camembert-and-brie-cheeses-enough-for-more-than-250l-of-milk/ Cheese White Mould Spores to make fantastic camembert Penicillium candidum http://mandarinpie.files.wordpress.com/2012/03/800px-coulommiers_lait_cru.jpg Nomenklatura http://www.cbs.knaw.nl/publications/Sim78/Identification-and-nomenclature-of-the-genus-Penicillium_ 2014_Studies-in-Mycology.pdf Penicillium • •Identifikace druhů rodu Penicillium •Polyfázická taxonomie: •http://www.cbs.knaw.nl/ * morfologie - anamorfa, teleomorfa * biochemie - sledování produkce sekundárních metabolitů * fyziologie - růst při 25, 37 °C, využívání různých zdrojů N * molekulární znaky – ITS, kalmodulin (CaM), β-tubulin (BenA) nebo RNA polymeráza II (podjednotka RPB2) •Vnitrodruhová typizace * multilokusová sekvenční typizace (MLST) – sekvenování fragmentů „referenčních“ genů * • • http://www.prolekare.cz/pdf?ida=vl_07_13_01.pdf#page=25&zoom=auto,-265,41 • • • • • * kolonie pestře pigmentované * rychlý růst * standardní živná média: CYA, MEA * kultivační teplota: 25°C, 37°C • •Nejvýznamnější makroskopické znaky: * rychlost růstu (velikost kolonií) * zbarvení kolonií, reverz kolonií, * povrchová struktura kolonií * produkce exudátu * produkce pigmentu Penicillium chrysogenum http://www.khoahoc.com.vn/doisong/ung-dung/5463_Nam-kho-bao-ve-bong-khoi-nam-gay-benh.aspx •Penicillium • • • • •Makroskopické znaky https://botany.natur.cuni.cz/sites/default/files/atlas-mikroskop-saprofytnich-hub/3.05_eurotiales-p en_subg_asp.pdf Foto.: A. Kubátová •Penicillium • • • • •Mikroskopické znaky • * nepohlavní stádium – štětičkovité konidiofory, konidie * pohlavní stádium - Eupenicillium, Talaromyces, charakteristické tvorbou drobných plodnic * hodnotí se stavba konidioforu • •Penicillium • • • • •Mikroskopické znaky • •4 typy konidioforů: • * monoverticilátní (podrod Aspergilloides) * terverticilátní (podrod Penicillium) * biverticilátně symetrický (podrod Biverticillium) * divarikátní (podrod Furcatum) • • •Penicillium • • • • •Fyziologické znaky • * médium CREA - agar s kreatinem a indikátorem pH (bromkresolový purpur), který je při výchozím pH 8 fialový * schopnost využívat kreatin jako zdroj N (růst) * schopnost tvorby kyselých látek (žluté zbarvení agaru) * schopnost tvorby zásaditých látek (fialové zbarvení agaru) • https://botany.natur.cuni.cz/sites/default/files/atlas-mikroskop-saprofytnich-hub/3.07_eurotiales-p en_subg_pen.pdf Foto.: A. Kubátová •Penicillium • • • • •Biochemické znaky (podrod Penicillium) • * detekce mykotoxinů povahy alkaloidů pomocí Ehrlichova činidla (dimethylaminobenzaldehyd, ethanol, HCl) * produkce kyseliny cyklopiazonové * pozitivní reakce: světle fialové „haló“ * některé druhy produkující alkaloidy, • které při reakci s Ehrlichovým činidlem vytvářejí • růžový, červený nebo žlutý prstenec • •http://www.cbs.knaw.nl/penicillium/ • • https://botany.natur.cuni.cz/sites/default/files/atlas-mikroskop-saprofytnich-hub/3.07_eurotiales-p en_subg_pen.pdf Foto.: A. Kubátová •Penicillium Schéma metod pro identifikaci rodu Penicillium • • • • •Penicillium roqueforti • * sametové, většinou bez rýh, tmavozelené, často s bílým třásnitým okrajem. Spodní strana olivově zelená až tmavě černozelená , roste 4 °C do 35 °C. https://en.wikipedia.org/wiki/Penicillium_roqueforti •Penicillium Blue Stilton Penicillium.jpg http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/images/plisne/kolonie/Penicillium%20roquef orti%20CCF%202310%20CYA%207-25.jpg http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/pen-roq.htm • • • • •Penicillium roqueforti • * konidiofory se silně bradavčitou stopkou, terverticilátně větvené * fialidy ampuliformní * konidie hladké, kulovité http://www.mycobank.org/Biolomics.aspx?Table=Mycobank&Page=200&ViewMode=Basic •Penicillium http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/images/plisne/mikro/Penicillium%20roquefor ti%20CCF%202310%20mikro.jpg http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/pen-roq.htm http://old.vscht.cz/obsah/fakulty/fpbt/ostatni/miniatlas/images/plisne/perokresby/Penicillium%20roq ueforti%20nakres.jpg • • • • •Paecilomyces •Fungi, Ascomycota, Pezizomycotina, Eurotiomycetes, Eurotiomycetidae, Eurotiales, Trichocomaceae • * podobná stavbu konidioforu jako penicilia, ale konidiofory jsou méně pravidelně větvené a fialidy jsou protáhlé v dlouhý krček • http://www.mold.ph/paecilomyces.htm Paecilomyces microscopic morphology