Indukce lyze UV-zářením
Lyzogenní kmen S. aureus
S26 = NCTC 8511 (53+)
O/N@37oC
6 ml
100 ml MPB
4h@37oC
O2
- centrifugace 10.000 ot - 10 min.
- resuspedovat v 10 ml fosf.pufru
- slít dohromady (homogenizace)
- po 10 ml na sterilní petriho misky
- ozařování UV – 30W, 60 cm
-30, 45, 60, 90, 120 sec.
O2
10 ml ozářených buněk
5 ml konc. yeast extraktu
5 ml konc. bujonu
35 ml fyziol. roztoku
cca 2h@37oC
ve tmě!!! (alobal)
- titrace na indikátorovém kmeni
(metoda dvojvrstevného agaru)
NCTC8511 (53-) ředění 10-5 – 10-8
Závěr: tabulka a graf vlivu doby ozáření
Na počet uvolněných fágových částic