Požadavky na protokoly: 1. Název skupiny, členové 2. Princip testu - Jednoduše popsat vlastními slovy princip testu – stačí pár vět 3. Výsledky - zpracovány v přehledné tabulce 4. Statistika – vyhodnocení dat, graf křivka dávka odpově’d 5. Závěr – slovní zhodnocení, pokud něco nevyšlo, úvaha proč, kde se stal chyby, kde mohly nastat problémy, atd. Počítání chvostoskoků: ‐ Stáhněte si tento program , je zdarma: Image tool. ‐ http://compdent.uthscsa.edu/dig/itdesc.html ‐ pozor funguje pouze pod staršími Windows (nefunguje pod XP, 7 atd.) ‐ Našíst obrázek – new picture (F2) ‐ Poté počítadlo kliků v horní liště Count a tag – pokaždé když kliknete, zaznačí se vám červený bod a počítatdo započítá klik. Pozor ! Dvojklik vše zruší! Statistické vyhodnocení 1) Vytvořte tabulku: Příklad pro test s roupicí Enchytraeus crypticus koncetrace mg/kg Dospělci - počet přeživších Juvenilové - počet narozených opak. 1 opak. 2 opak. 1 opak. 2 0 (kontrola) 10 10 321 357 31 10 10 334 329 63 10 9 327 304 125 9 8 241 239 250 7 7 179 154 500 5 6 58 67 1000 2 2 47 40 2000 1 0 26 0 4000 0 0 0 0 U mortality zapište tzv. survival (= přežívání) počet živých organismů na konci testu. ‐ Důvodem je, že v této podobě parametr s narůstající koncentrací klesá, stejně jako u ‐ reprodukce. ‐ U reprodukce zapište počet juvenilů na konci testu. ‐ V programu MS Excel vypočítejte průměrnou hodnotu, směrodatnou odchylku (SD) a ‐ relativní směrodatnou odchylku (RSD, tj. koeficient variance, CV, SD dělená ‐ průměrem v procentech) pro každou koncentraci pro oba parametry. GraphPad – výpočet LC50 a EC50 Před exportem do graphpadu, zlogaritmujte sloupec s hodnotami koncentrace – pro vytvoření sigmoidalní odpovědi Vytvořte si v excelu jednoduchou tabulku pro export dat: (Vytvořte pro dospělce i pro juvenily) koncentrace  počet juvenilů  opak.1  počet juvenilů  opak. 2  0 321 357 31 334 329 63 327 304 125 241 239 250 179 154 500 58 67 1000 47 40 2000 26 0 4000 0 0 V případě salátu, vypočtete pouze EC50 Tabulka bude vypadat takto: (hodnoty jsou fiktivní), nezapomeňte před analýzou zlogaritmovat osu x -tzn. Koncentrace! koncentrace  průměrná délka  kořínků v misce č.1  průměrná délka  kořínků v misce č.2 0  31,33  25,6 63  24,67  25,27 250  10,6  11,6 2000  5  6 4000  0  0 Další analýzy jsou společné a stejné pro všechny případy – salát, roupice, chvostoskoci (mortalita dospělců i počet juvenilů) Nakopírujte data do Graphpadu aby jste vytvořili takovouto tabulku: Takto bude vypadat graf pro počet juvenilů V liště nad grafem je ikonka Analyze – přejděte k výpočtu IC 50 Analyze Data -> XY analyzes -> Non linear regression Vyberte analýzu: Dose-response –Inhibition -log(inhibitor) vs. Response = vašimi daty bude proložena křivka a v results bude v tabulce vypsána hodnota IC 50 ‐ proveďte to samé i pro data na dospělcích (roupice i chvostoskoci) a pro salát