2a_Chromatografie – AK+bílkoviny


 1. Jaké pořadí eluce uvedených aminokyselin lze očekávat při jejich IEC?

a)      Gly, Asp, His

b)      Arg, Glu, Ala

c)      Phe, His, Glu



 2. V jakém pořadí  budou následující proteiny eluovány z kolony DEAE-Sephadexu stoupajícím
gradientem soli – pI jednotlivých bílkovin je uvedeno:

Vaječný albumin – 4,6, Cytochrom c – 10,6, Pepsin – 1,0, Myoglobin – 6,8, Serový albumin – 4,9,
Hemoglobin – 6,8.




 3. Aminokyseliny a mastné kyseliny se nedají běžně dělit pomocí GC i při teplotách nad 200 ^oC.
Jak byste dosáhli zlepšení?



 4. Popište užívané metody detekce při HPLC. Které typy biomolekul jsou detektovány jednotlivými
metodami?



 5. Vyjmenujte 3 enzymy, o nichž lze předpokládat, že se budou vázat na afinitní nosič
5’-AMP-Sepharosu.




 6. Jak by se dal určit vylučovací limit pro Sephadex, když se ztratila popiska z jeho láhve?



 7. Alkoholdehydrogenasa je vázána na sloupci Cibacron Blue Sepharosy. Jak dosáhnete její „afinitní
eluce“?