Plotnová metoda – Nepřímé stanovení počtu buněk

Cíl praktického cvičení




V čem se liší stanovení počtu buněk nepřímou metodou (v tomto případě plotnovou metodou) od
stanovení přímého?




S jakými typy médií je možné pracovat u plotnové metody?




Co je to CFU/ml? Zahrnuje tento údaj i buňky mrtvé?




K čemu při plotnové metodě slouží řada zkumavek se sterilním ředícím roztokem? Podle čeho se
stanovuje počet zkumavek této řady?




Co lze sledovat pomocí hodnot CFU/ml – jsou-li v pravidelných intervalech odebírány a sledovány
dané vzorky?




Pomůcky

Bakteriální kmen:


Pomůcky:





Postup plotnové metody


a) odvození počtu zkumavek ředící řady





b) ředění vzorku



c) pipetování jakého objemu a jakého ředění probíhá na Petriho misky se sterilním médiem? K čemu
slouží sterilní L-klička/„hokejka“? Jakým postupem vytvoříte kontrolní vzorek?





Při jaké teplotě budeme misky plotnové metody kultivovat?




Vyhodnocení

Vybrané vhodné ředění


Misky

                     Miska 1

                            Miska 2

Počet kolonií



Průměr




Závěr – posouzení kontaminace ředícího roztoku, misek, správnost roztěru vzorků, počitatelnost,
apod.