Sylabus Bi 7270c Rostlinná embryologie - cvičení 0/3 (H. Cempírková) PS 2019 1) 18.9.2019 Úvod do problematiky, literatura, protokoly, opakování z Botanické mikrotechniky: Stavba a funkce různých typů mikroskopů pracujících v procházejícím světle (Plösl – Berlin: „mikroskop J.E. Purkyně“; Carl Zeiss – Jena: Lumipan, Laboval 3, Amplival, Peraval; PZO – Varšava: Biolar; Meopta – Praha: Meopta Bi; Olympus – Tokio: Olympus BX31, Olympus BX50, Olympus BX51); Köhlerův princip, Abbeův kondenzor, pankratický kondenzor, mikroskopie v dopadajícím světle (Lug-Zeiss). Desatero světelné mikroskopie. Ruční řezy a opakování základních anatomických struktur rostlin. 2) 25.9.2019 Anatomická stavba květů. Rozlišení květů podle způsobu opylení. Samooplození, cizosprašnost. 3) 2.10.2019 Klíčení pylu in situ a in vitro: Viabilita pylu a metody jejího určování, pozorování pylových láček in vitro = tj. pozorování živých (fázových) objektů metodou fázového kontrastu, opakování stavby fázového kondenzoru a fázových objektivů a nastavení fázového kontrastu. Fluorescence pylu – autofluorescence, FDA, PI. 4) 9.10.2019 Mikrosporogeneze a mikrogametogeneze: Soubor tyčinek (androeceum), tyčinka, vývoj a stavba prašníku, exothecium, endothecium, tapetum, konektiv, stomium, meióza, tetrády mikrospor, vývoj a zrání pylu, stěna pylového zrna, typy pylových zrn, barvení pylových zrn. mikroskopování trvalých preparátů – vývoj prašníků tabáku a lilie, barvení pylu, vyhodnocení klíčení pylu 5) 16.10.2019 Makrosporogeneze a makrogametogeneze: Soubor plodolistů (gynaeceum), vývoj a stavba pestíku, stavba vajíčka krytosemenných rostlin, meioze, tetrády makrospor, polarita, vývoj zárodečného vaku, typy zárodečných vaků, metody projasňování rostlinného materiálu, šikmé osvětlení, Nomarského diferenciální interferenční kontrast. 6) 23.10.2019 Vývoj embrya krytosemenných rostlin: Vývojové fáze embrya, embryogenetické typy, vývoj endospermu, typy endospermu (jaderný, buněčný, helobiální). Řezové preparáty Capsella, Arabidopsis, projasňování, fázový kontrast, DIC 7) 30.10.2019 Plody a semena: semeno jako počátek nového cyklu, příklady různých typů plodů, stavba semene krytosemenných rostlin (osemení, endosperm, embryo), klid a dormance semen, klíčení semen a stavba klíční rostlinky. morfologie plodů, preparace částečně naklíčených semen dvouděložných rostlin s přímými embryi 8) 6.11.2019 Histologické techniky v rostlinné embryologii I.:. Zalévání do parafínu, řezání na mikrotomu a ultramikrotomu, žehlení a lepení řezů, odparafínování řezů krájení pestíků lilie + řezové preparáty 9) 13.11.2019 Histologické techniky v rostlinné embryologii II.: barvení řezů, uzavírací média, montáž řezů. Fotodokumentace nabarvených řezů. projasňování, barvení odparafínovaných řezů 10) 20.11.2019 Primární meristémy: Stonkový apikální meristém (struktura, kmenové buňky, stonkový vegetativní meristém, listová primordia a meristémy listu, diferenciace pletiv listu, generativní meristém, kořenový apikální meristém, axilární meristémy u tabáku. trvalé preparáty – podélné parafínové řezy klíční rostlinou – tabák, Arabidopsis, mikrofotografie vybraných řezů 11) 27.11.2019 Kořenový apikální meristém: Buněčný cyklus a jeho fáze, formace cytoskeletu v průběhu mitotického dělení, polarita, asymetrické dělení (vývoj průduchů, vývoj kořenových vlásků), rychlé cytologické metody, typy barviv pro barvení roztlakových preparátů (acetokarmín, laktopropionový orcein, Cajal-Brožkovo barvení, Giemsa), předpůsobení pro karyologická studia, klasifikace meristémů (primární a sekundární meristémy). předpůsobení kořenů, Cajal-Brožkovo barvení 12) 4.12.2019 Hodnocení zhotovených roztlakových preparátů kořenových špiček mikroskopování a fotodokumentace 13) 11.2.2019 Téma bude upřesněno 14) 18.12.2019 Zápočet, kontrola protokolů Pozn.: Náplň a časový harmonogram se může změnit v průběhu semestru. Doporučená literatura 1. Braune W., Leman A., Taubert H.: Pflanzenanatomisches Praktikum I.,II., Gustav Fischer, Jena, 1983, 1982. 2. Fosket D.E.: Plant Growth and Development. A Molecular Approach. - Academic Press, San Diego, 1994. 3. Jásik J.: Praktikum z cytológie rastlín.- Skriptum UKom.,Bratislava, 1995. 4. Kiernan J.: Histological and Histochemical Methods. Theory and Practise. - Pergamon Press, 1979. 5. Knoz J., Opravilová V.: Základy mikroskopické techniky. - Skriptum MU, Brno, 1992. 6. Lojda Z. et al.: Enzyme Histochemistry. A laboratory Manual. - Springer Berlin etc., 1979. 7. Němec B. et al.: Botanická mikrotechnika. - ČSAV, Praha, 1962. 8. Pazourek J.: Pracujeme s mikroskopem. - SNTL Praha, 1961. 9. Pazourková Z.: Botanická mikrotechnika. - Skriptum UK, Praha, 1986. 10. Raghavan V.: Molecular Embryology of Flowering Plants. – Cambridge University Press 1997. 11. Raghavan V.: Double Fertilization. Embryo and Endosperm Development in Flowering Plants. – Springer Berlin etc., 2006. 12. Lux A., Erdelská O. et al. : Praktikum z anatómie a embryológie rastlín. – Skriptum UKom., Bratislava, 1998. 13. Lux A., Morita S., Abe J. et Ito K.: An Improved Method for Clearing and Staining Free-hand Sections and Whole-mount Samples. - Ann. Bot. 96:989 – 996, 2005. 14. Luxová M.: Zemědělská botanika 1. Anatomie a morfologie rostlin.- 2. Vyd., SZN Praha, 1976 15. Michalová K. et al.: Vybrané metody studia chromozómů. - Skriptum UK Praha, 1989. 16. Žárský V. et Cvrčková F. (Eds./: Plant Cell Morphogenesis. Methods nd Protocols. – Springer Protocols, Humana Press, New York: Springer, 2014.