C5720 Biochemie 15b-Metabolismus dusíku 11/5/2018 1 Petr Zbořil Obsah •Vylučování dusíku, význam glutamát dehydrogenasy, glutaminsyntetasy. •Močovinový cyklus, jeho bilance. •Kys. močová. •Asimilace amoniaku. • 11/5/2018 Petr Zbořil 2 Přehled produkce amoniaku 11/5/2018 Petr Zbořil 3 •Deaminace a transaminace •Přímá a nepřímá •(dehydratasy) •eliminace •His, Ser, Tre, homoserin •(methionin) • • • Přehled produkce amoniaku 11/5/2018 Petr Zbořil 4 •Přímá a nepřímá (dehydratasy) eliminace oHis, Ser, Tre, homoserin (methionin) •Transaminací purinů • • Vylučování toxického amoniaku • •Způsoby oPřímo jako NH4+ - amonotelní oCesta přes Gln – Glu + NH4+ = Gln (spotřeba ATP, glutamin syntetasa) oCestou purinů – syntéza kys. močové – urikotelní (necesita - eventualita) oCestou močoviny – ureotelní – ornitinový cyklus • • 11/5/2018 Footer Text 5 Močovina •Ornitinový cyklus oSled reakcí oZdroje N • •1 – ornitintranskarbamoylasa •2 – argininosukcinát syntetasa •3 – argininosukcinát lyasa •4 - arginasa • o o 11/5/2018 Footer Text 6 Močovina •Ornitinový cyklus oLokalizace oMitochondrie oCytoplasma oTransport metabolitů o 11/5/2018 Footer Text 7 Močovina •Bilance cyklu •Karbamoylsynthetasa I - 2 ATP (CPS II – Gln!) o- aktivace CO2 + ATP = HO-CO-P + ADP o- HO-CO-P + NH3 = HO-CO-NH2 + Pi o- ATP + HO-CO-NH2 = P-CO-NH2 + ADP • • • • • •Kofaktorem je N-acetylGlu 11/5/2018 Footer Text 12 Močovina •Bilance cyklu •Karbamoylsynthetasa I - 2 ATP o- aktivace CO2 + ATP = HO-CO-P + ADP o- HO-CO-P + NH3 = HO-CO-NH2 + Pi o- ATP + HO-CO-NH2 = P-CO-NH2 + ADP •Argininosukcinát syntetasa – 1 ATP na AMP – eq. 2 oPosun reakce formálně snadno probíhající – Schiffova •Celkem 3, ale eq. 4 ATP oNáročný, ale nutný pochod 11/5/2018 Footer Text 13 Močovina • • • • • • • • • • •Ornitinový cyklus - vnější vztahy (vztah k citrátovému cyklu) • 11/5/2018 Footer Text 14 Močovina •Vztahy mezi orgány • 11/5/2018 Footer Text 15 n-circ.gif ALT Charakteristika forem odpadního dusíku •Formy oPřímo jako NH4+ - amonotelní •Jednoduché, bazický •Podmínka – vodné prostředí, ředění oKys. močová – viz kap. 2 puriny •Špatně rozpustná •↑Urikotelní – šetření vodou, vejcorodí – nevadí embryu •↓Savci (člověk) – ukládání krystalků, močové kameny, dna oMočovina – ureotelní – ornitinový cyklus •Dobře rozpustná, neutrální •Snadno vylučována ledvinami •Parametr zdravotního stavu 11/5/2018 Footer Text 16 Asimilace amoniaku • •Amoniak produkovaný mineralizací •Amoniak syntetizovaný z N2 – nitrogesasa, kap. 10 •Amoniak produkovaný denitrifikací (asimilační) •Primární role Glu •Reduktivní aminace •Pomocí GOGAT • 11/5/2018 Footer Text 17 Asimilace amoniaku •Primární role Glu oRedukční aminace oPomocí GOGAT • • • • • • • •Redukční aminace GDH • 11/5/2018 Footer Text 18 Asimilace amoniaku •Transaminace •GOGAT oGlutamin:oxoglutarát oaminotransferasa, glutamát osyntasa •Efektivní způsob • 11/5/2018 Petr Zbořil 19 Syntéza Gln • 11/5/2018 Petr Zbořil 20