Praktikum z molekulární biologie p roka ryot - BÍ7311 úterý: 13:00 - 16:50; čtvrtek: 09:00 - 09:50 místnost: E25-119 I. skupina_ Datum č. Úloha 3.2021 Bezpečnost práce a rozdělení studentů do skupin, informace k cvičení pro všechny zaregistrované 05.10.2021 07.10.2021 1 1. Úloha: Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten 1. Úloha: Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten - pokračování, II.Úloha: HGT: GTA - příprava a teorie 12.10.2021 14.10.2021 2 I. Úloha: Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten - přečárkování sp. mutant; II.Úloha: HGT - transdukce phiJB, GTA - přenos do recipienta II. Úloha: HGT - transdukce phiJB, GTA - vyhodnocení, 1. Úloha: Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten - vyhodnocení 19.10.2021 21.10.2021 3 III. Úloha: Konjugace; IV. Úloha: PFGE - příprava bločků z transduktant a polylysogenních lab. kmenů III. Úloha: Konjugace vyhodnocení frekvence; IV. Úloha: PFGE - instrukce k vlastnímu přístroji 26.10.2021 02.11.2021 4 IV. Úloha: PFGE - štěpení bločků; V. Úloha: Konformace plazmidové DNA (pDNA bude k dispozici, dělají ELFO), PCR na geny rezistence na plazmidech; VI. Úloha: Sestřih fágového endolyzinu: Izolace RNA Trizolem IV. Úloha:PFGE - nanášení na gel 02.11.2021 04.11.2021 5 VI. Úloha: Sestřih fágového endolyzinu - přepis RNA do cDNA, PCR VI. Úloha: Sestřih fágového endolyzinu - ELFO; V. Úloha: PCR na geny rezistence - ELFO 09.11.2021 11.11.2021 6 VII. Úloha: Stanovení počtu plazmidů pomocí qPCR v donorových a recipientních kmenech z úlohy č. II VII. Úloha: Stanovení počtu plazmidů pomocí qPCR v donorových a recipientních kmenech - vyhodnocení; kontrola vyplněných pracovních listů II. skupina Datum č. Úloha 09.11.2021 11.11.2021 1 1. Úloha: Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten 1. Úloha: Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten - pokračování, II.Úloha: HGT: GTA - příprava a teorie 16.11.2021 18.11.2021 2 I. Úloha: Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten - přečárkování sp. mutant; II.Úloha: HGT - transdukce phiJB, GTA - přenos do recipienta II. Úloha: HGT - transdukce phiJB, GTA - vyhodnocení, 1. Úloha: Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten - vyhodnocení 23.11.2021 25.11.2021 3 III. Úloha: Konjugace; IV. Úloha: PFGE - příprava bločků z transduktant a polylysogenních lab. kmenů III. Úloha: Konjugace vyhodnocení frekvence; IV. Úloha: PFGE - instrukce k vlastnímu přístroji 30.11.2021 02.12.2021 4 IV. Úloha: PFGE - štěpení bločků; V. Úloha: Konformace plazmidové DNA (pDNA bude k dispozici, dělají ELFO), PCR na geny rezistence na plazmidech; VI. Úloha: Sestřih fágového endolyzinu: Izolace RNA Trizolem IV. Úloha:PFGE - nanášení na gel 07.12.2021 09.12.2021 5 VI. Úloha: Sestřih fágového endolyzinu - přepis RNA do cDNA, PCR VI. Úloha: Sestřih fágového endolyzinu - ELFO; V. Úloha: PCR na geny rezistence - ELFO 14.12.2021 16.12.2021 6 VII. Úloha: Stanovení počtu plazmidů pomocí qPCR v donorových a recipientních kmenech z úlohy č. II VII. Úloha: Stanovení počtu plazmidů pomocí qPCR v donorových a recipientních kmenech - vyhodnocení; kontrola vyplněných pracovních listů 04.11.2021 16.12.2021 Závěrečný test na zápočet - skupina 1. Závěrečný test na zápočet - skupina 2. Seznám úloh plánovaných na podzim 2021: 1. Izolace spontánních mutant metodou gradientních ploten 2. HGT - transdukce phiJB, GTA 3. Konjugace 4. PFGE 5. Konformace plazmidové DNA 6. Sestřih fágového endolyzinu (metoda izolace RNA Trizolem, přepis do cDNA, PCR) 7. Stanovení počtu plazmidů pomocí qPCR