Analýza pesticidů v ovoci a zelenině – postup práce
Ana Maria Miralles Marco, Ph.D.; Simona Rozárka Jílková, Ph.D.
ÚVOD
Protokol popisuje postup přípravy vzorků pro analýzu zbytků pesticidů v ovoci a zelenině s vysokým
obsahem vody a nízkého obsahu tuku pomocí ultra vysokotlaké kapalinové chromatografie (UHPLC)
spojené s detekcí pomocí vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie (HRMS).
MATERIÁL
Matrice
Uvedený postup je použitelný pro ovoce a zeleninu s vyšším obsahem vody jak 70 % a obsahem tuku
nižším jak 10 %.
Chemikálie
• Methanol (MeOH)
• Voda
• Acetonitril (ACN)
• Kyselina octová
• Síran hořečnatý (MgSO4)
• Chlorid sodný (NaCl)
• Primární a sekundární aminy (PSA)
Materiál
• 15 ml polypropylenové zkumavky
• 50 ml polypropylenové zkumavky
• 2 ml tmavé vialky
• Mixér
• Skleněné nádoby pro uchování potravin
• Analytické váhy
• Třepačka
• Centrifuga
• Koncentrátor LabEva
POSTUP PRÁCE
Mixování jídla
• Vyčistěte mixér methanolem.
• Nakrájejte vzorky na větší kousky a vložte do mixéru.
• Mixujte 1-2 minuty dokud vzorek nebude homogenizován.
• Přemístěte vzorek do skleněné nádoby a uchovejte v mrazáku do dalšího kroku.
Extrakce
• Navažte 15 g vzorku do 50 ml zkumavky (A).
• Navažte 6 g MgSO4 a 1,5 g NaCl do 15 ml zkumavky (B).
• Navažte 150 mg primárních a sekundárních aminů a 900 mg MgSO4 do 15 ml zkumavky (C).
• Přidejte interní/výtěžnostní standardy ke vzorku (zkumavka A).
• Přidejte 10 ml roztoku acetonitrilu s 1 % kyseliny octové (198 ml acetonitriliu a 2 ml kyseliny
octové) do zkumavky A a protřepejte ručně.
• Přidejte obsah zkumavky B do zkumavky A.
• Třepejte zkumavkou A 1 minutu.
• Vzorek vložte do centrifugy na 3 minuty (3 000 rpm).
• Odeberte 5 ml extraktu do 15 ml zkumavky (D).
Čištění
• Přidejte obsah zkumavky C do zkumavky D.
• Třepejte zkumavku D 1 minutu.
• Vzorek vložte do centrifugy na 5 minuty (3 000 rpm).
• Odeberte 1 ml čistého extraktu do 2 ml tmavé vialky.
• Odpařte vzorek pod proudem dusíku do sucha a přidejte 0,5 ml MeOH.
• Vzorek skladujte v mrazáku do analýzy.
Analýza
Obsah pesticidů ve vzorcích bude změřen pomocí ultra vysokotlaké kapalinové chromatografie
(UHPLC) spojené s detekcí pomocí vysokorozlišovací hmotnostní spektrometrie (HRMS).