Přirozená imunita ryb

SILNICOVÁ, Kateřina, Libor VOJTEK and Pavel HYRŠL. Přirozená imunita ryb (Fish innate immunity). In Zoologické dny. 2013. ISBN 978-80-87189-14-6.

Basic information

• Original name: Přirozená imunita ryb
• Name in Czech: Přirozená imunita ryb
• Name (in English): Fish innate immunity
• Authors: SILNICOVÁ, Kateřina (203 Czech Republic, belonging to the institution), Libor VOJTEK (203 Czech Republic, belonging to the institution) and Pavel HYRŠL (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution).
• Edition: Zoologické dny, 2013.

Other information

• Original language: Czech
• Type of outcome: Conference abstract
• Field of Study: 30102 Immunology
• Country of publisher: Czech Republic
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• RIV identification code: RIV/00216224:14310/13:00066008
• Organization unit: Faculty of Science
• ISBN: 978-80-87189-14-6
• Keywords (in Czech): ryby; imunita; komplement; oxidační vzplanutí
• Keywords in English: fish; immunity; complement; oxidative burst

Abstract

Přirozenou imunitu ryb lze rozdělit na složku buněčnou a humorální. Mezi buněčnou patří především fagocytóza a mezi humorální zejména antibakteriální působení komplementu.Optimalizační testy metod probíhaly na kaprech obecných (Cyprinus carpio), hlavní část experimentů potom na karasech stříbřitých (Carassius auratus) (samice, samci, diploidní, triploidní). Pro srovnání jednotlivých parametrů přirozené imunity ryb jsme použili chemiluminiscenční stanovení oxidativního vzplanutí fagocytů. Při tomto ději fagocyty produkují velké množství reaktivních metabolitů kyslíku, které jsou pro patogeny toxické. Použili jsme dva různé luminofory (luminol a pholasin) a čtyři aktivátory fagocytů (opsonizovaný a neopsonizováný zymozan, PMA a fMLP). Další použitou metodou je stanovení aktivity komplementu. Hlavní vlastností komplementu je jeho schopnost lyzovat buňky a zabíjet tak patogeny. Použili jsme metodu inhibice bioluminiscenčních bakterií E.coli K12 (geneticky modifikované, obsahující gen pro bakteriální luciferázu a její substrát). Sledována byla aktivace klasickou a alternativní cestou.Posledním sledovaným parametrem byla aktivita antioxidačních enzymů: superoxiddismutázy - SOD, malondialdehydu - MDA a glutation S transferázy - GST, tyto enzymy (v případě MDA produkt enzymové reakce), snižují množství reaktivních metabolitů kyslíku a brání tak buňku před oxidačními účinky. U karasů jsme navíc stanovili množství glukózy v plasmě (indikátor míry stresu u ryb), jejíž průměrné hodnoty dosahovaly 8 mmol/l a lysozym přítomný v kožním mukusu s hodnotami přibližně 0,1 mg/ml. Námi použité testy jsou vhodné pro kapry i karase. Antioxidační enzymy byly měřitelné pouze u kaprů, kteří byli před odběry více stresováni. Nově jsme použili pholasin při detekci oxidativního vzplanutí, kde se projevila jeho vysoká citlivost proti luminolu. Naším cílem je dále porovnat měřené parametry u pohlaví a různých ploidií karasů. Tato práce je podporována grantem GAČR P505/12/0375.

Abstract (in English)

Přirozenou imunitu ryb lze rozdělit na složku buněčnou a humorální. Mezi buněčnou patří především fagocytóza a mezi humorální zejména antibakteriální působení komplementu.Optimalizační testy metod probíhaly na kaprech obecných (Cyprinus carpio), hlavní část experimentů potom na karasech stříbřitých (Carassius auratus) (samice, samci, diploidní, triploidní). Pro srovnání jednotlivých parametrů přirozené imunity ryb jsme použili chemiluminiscenční stanovení oxidativního vzplanutí fagocytů. Při tomto ději fagocyty produkují velké množství reaktivních metabolitů kyslíku, které jsou pro patogeny toxické. Použili jsme dva různé luminofory (luminol a pholasin) a čtyři aktivátory fagocytů (opsonizovaný a neopsonizováný zymozan, PMA a fMLP). Další použitou metodou je stanovení aktivity komplementu. Hlavní vlastností komplementu je jeho schopnost lyzovat buňky a zabíjet tak patogeny. Použili jsme metodu inhibice bioluminiscenčních bakterií E.coli K12 (geneticky modifikované, obsahující gen pro bakteriální luciferázu a její substrát). Sledována byla aktivace klasickou a alternativní cestou.Posledním sledovaným parametrem byla aktivita antioxidačních enzymů: superoxiddismutázy - SOD, malondialdehydu - MDA a glutation S transferázy - GST, tyto enzymy (v případě MDA produkt enzymové reakce), snižují množství reaktivních metabolitů kyslíku a brání tak buňku před oxidačními účinky. U karasů jsme navíc stanovili množství glukózy v plasmě (indikátor míry stresu u ryb), jejíž průměrné hodnoty dosahovaly 8 mmol/l a lysozym přítomný v kožním mukusu s hodnotami přibližně 0,1 mg/ml. Námi použité testy jsou vhodné pro kapry i karase. Antioxidační enzymy byly měřitelné pouze u kaprů, kteří byli před odběry více stresováni. Nově jsme použili pholasin při detekci oxidativního vzplanutí, kde se projevila jeho vysoká citlivost proti luminolu. Naším cílem je dále porovnat měřené parametry u pohlaví a různých ploidií karasů. Tato práce je podporována grantem GAČR P505/12/0375.

Links

• GAP505/12/0375, research and development project: Name: Evolučně-imunitní a ekologické aspekty parazitace u hybridních a polyploidních kaprovitých ryb

Investor: Czech Science Foundation