a 2013

Koagulace hemolymfy hmyzu a její úloha v imunitních reakcích

BERKA, Jakub, Pavel DOBEŠ and Pavel HYRŠL

Basic information

Original name

Koagulace hemolymfy hmyzu a její úloha v imunitních reakcích

Name in Czech

Koagulace hemolymfy hmyzu a její úloha v imunitních reakcích

Name (in English)

Haemolymph clotting and its role in immune reactions

Authors

BERKA, Jakub (203 Czech Republic, belonging to the institution), Pavel DOBEŠ (203 Czech Republic, belonging to the institution) and Pavel HYRŠL (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution)

Edition

Zoologické dny, 2013

Other information

Language

Czech

Type of outcome

Konferenční abstrakt

Field of Study

30102 Immunology

Country of publisher

Czech Republic

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

RIV identification code

RIV/00216224:14310/13:00065678

Organization unit

Faculty of Science

ISBN

978-80-87189-14-6

Keywords (in Czech)

koagulace; hmyz; Drosophila

Keywords in English

clotting; insect; Drosophila
Změněno: 30/1/2016 23:22, Mgr. Pavel Dobeš, Ph.D.

Abstract

ORIG EN

V originále

Koagulace je jednou ze základních fyziologických a imunitních reakcí bezobratlých i obratlovců. Udržuje homeostázi, brání nadměrným ztrátám tělních tekutin a vniknutí potenciálních patogenů do těla. Ideálním modelem pro studium imunity hmyzu je Drosophila melanogaster jakožto dobře prostudovaný a geneticky snadno modifikovatelný organismus. K dispozici je mnoho mutantních a RNAi linií, které umožňují testovat funkce vybraných genů po jejich zablokování. Ke studiu koagulace jsme použili RNAi linie D. melanogaster, které umožňují utlumit produkci enzymu transglutaminázy (TG) důležitého pro zachycení bakterií a zesíťování koagulační zátky. Po vypnutí genu pro TG jsme zjistili defekt v obraně proti nákaze entomopatogenními hlístovkami (EPN). EPN jsou přirození parazité hmyzu, kteří žijí v symbióze s entomopatogenními bakteriemi. Použili jsme několik druhů EPN lišících se svojí patogenitou i ekologií. Nejčastěji využívanými jsou zástupci Steinernematidae a Heterorhabditidae, kteří se uplatňují také v biologickém boji s hmyzími škůdci. Základem našeho testu je inkubace larev D. melanogaster s různými druhy EPN a hodnocení mortality způsobené touto nematobakteriální nákazou. Larvy s ovlivněnou koagulací vykazují oproti kontrolním larvám vyšší mortalitu. Touto metodou lze provádět také testování dalších kandidátních genů, u nichž předpokládáme význam v obraně proti nematobakteriálním patogenům. Jako pozitivní kontrolu používáme dvojité mutanty mušek mající defekt v „immune deficiency“ signální dráze řídící produkci antimikrobiálních peptidů a zároveň nefunkční krystalové buňky, které hrají úlohu v produkci phenoloxidázy. Tyto larvy mají po nákaze určitými druhy EPN až dvojnásobně vyšší úmrtnost než wild type larvy. Studium koagulace hemolymfy je velice zajímavou oblastí v imunologii živočichů a prohloubení znalostí tohoto systému nám může poskytnout nový ucelenější pohled na imunitu hmyzu a vrozenou imunitu obecně. Tato práce byla podpořena projekty STINT a NAZV-KUS QJ1210047.

In English

Koagulace je jednou ze základních fyziologických a imunitních reakcí bezobratlých i obratlovců. Udržuje homeostázi, brání nadměrným ztrátám tělních tekutin a vniknutí potenciálních patogenů do těla. Ideálním modelem pro studium imunity hmyzu je Drosophila melanogaster jakožto dobře prostudovaný a geneticky snadno modifikovatelný organismus. K dispozici je mnoho mutantních a RNAi linií, které umožňují testovat funkce vybraných genů po jejich zablokování. Ke studiu koagulace jsme použili RNAi linie D. melanogaster, které umožňují utlumit produkci enzymu transglutaminázy (TG) důležitého pro zachycení bakterií a zesíťování koagulační zátky. Po vypnutí genu pro TG jsme zjistili defekt v obraně proti nákaze entomopatogenními hlístovkami (EPN). EPN jsou přirození parazité hmyzu, kteří žijí v symbióze s entomopatogenními bakteriemi. Použili jsme několik druhů EPN lišících se svojí patogenitou i ekologií. Nejčastěji využívanými jsou zástupci Steinernematidae a Heterorhabditidae, kteří se uplatňují také v biologickém boji s hmyzími škůdci. Základem našeho testu je inkubace larev D. melanogaster s různými druhy EPN a hodnocení mortality způsobené touto nematobakteriální nákazou. Larvy s ovlivněnou koagulací vykazují oproti kontrolním larvám vyšší mortalitu. Touto metodou lze provádět také testování dalších kandidátních genů, u nichž předpokládáme význam v obraně proti nematobakteriálním patogenům. Jako pozitivní kontrolu používáme dvojité mutanty mušek mající defekt v „immune deficiency“ signální dráze řídící produkci antimikrobiálních peptidů a zároveň nefunkční krystalové buňky, které hrají úlohu v produkci phenoloxidázy. Tyto larvy mají po nákaze určitými druhy EPN až dvojnásobně vyšší úmrtnost než wild type larvy. Studium koagulace hemolymfy je velice zajímavou oblastí v imunologii živočichů a prohloubení znalostí tohoto systému nám může poskytnout nový ucelenější pohled na imunitu hmyzu a vrozenou imunitu obecně. Tato práce byla podpořena projekty STINT a NAZV-KUS QJ1210047.

Links

QJ1210047, research and development project
Name: Vývoj nových prostředků pro podporu imunity včel, prevenci a léčbu včelích onemocnění (Acronym: Probiotika - imunita včel)
Investor: Ministry of Agriculture of the CR