a 2014

Production of human proteins using well-established and alternative recombinant expression hosts

MRÁZKOVÁ, Jana, Gita JANČAŘÍKOVÁ, Marie POKORNÁ, Peter KYSEĽ, Michaela WIMMEROVÁ et. al.

Basic information

Original name

Production of human proteins using well-established and alternative recombinant expression hosts

Name in Czech

Produkce lidských proteinů pomocí zavedených a alternativních rekombinantních expresních hostitelů

Authors

MRÁZKOVÁ, Jana (203 Czech Republic, belonging to the institution), Gita JANČAŘÍKOVÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution), Marie POKORNÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution), Peter KYSEĽ (703 Slovakia, belonging to the institution) and Michaela WIMMEROVÁ (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution)

Edition

39th FEBS Congress, 2014

Other information

Language

English

Type of outcome

Konferenční abstrakt

Field of Study

10600 1.6 Biological sciences

Country of publisher

France

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

Impact factor

Impact factor: 4.001

RIV identification code

RIV/00216224:14310/14:00074242

Organization unit

Faculty of Science

ISSN

DOI

Keywords (in Czech)

Escherichia coli; produkce lidských proteinů; Leishmania tarentolae

Keywords in English

Escherichia coli; human proteins production; Leishmania tarentolae
Změněno: 2/1/2015 12:44, Mgr. Jana Šístková, Ph.D.

Abstract

ORIG CZ

V originále

In our work, we demonstrate using several approaches of production of a difficult-obtainable human lectin. We tried production of this protein using well-established E. coli expression host but this way failed because the protein is produced in the insoluble form only. Hence refolding, in vitro denaturation/renaturation and some solubility-enhancing tags were utilized to obtain protein in soluble form. Finally, it turned out that the L. tarentolae possibilities of the disulfide bond formation and the human-like glycosylation are crucial for a sufficient production of our target protein and it seems to be the very effective system for a routine production of human proteins in general.

In Czech

V naší práci demonstrujeme využití několika přístupů k produkci obtížně získatelného lidského lektinu. Snažili jsme se o produkci tohoto pomocí dobře zavedeného E. coli expresního hostitele, ale tento způsob selhal, protože protein byl produkován pouze v nerozpustné formě. Pro získání proteinu v rozpustné formě byl zkoušen refolding, in vitro denaturace/ renaturace a připojování tagů zvyšujících rozpustnost. Nakonec se ukázalo, že možnost tvorby disulfidových vazeb a glykosylace podobné těm lidským u L. tarentolae jsou rozhodující pro dostatečnou produkci našeho cílového proteinu a zdá se, že L. tarentolae je velmi účinný systém pro rutinní produkci lidských proteinů obecně.

Links

CZ.1.05/1.1.00/02.0068, interní kód MU
Name: CEITEC - středoevropský technologický institut (Acronym: CEITEC)
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, CEITEC - Central European Institute of Technology, 1.1 European Centres of Excellence
GA13-25401S, research and development project
Name: Studium proteinů z patogenů zapojených do rozpoznávání hostitelského organismu
Investor: Czech Science Foundation