2016
High-quality full-length immunoglobulin profiling with unique molecular barcoding
TURCHANINOVA, M. A.; Alexey Nikolayevich DAVYDOV; O. V. BRITANOVA; Mikhail SHUGAY; Vasileios BIKOS et. al.Základní údaje
Originální název
High-quality full-length immunoglobulin profiling with unique molecular barcoding
Autoři
TURCHANINOVA, M. A. (643 Rusko); Alexey Nikolayevich DAVYDOV (643 Rusko, domácí); O. V. BRITANOVA (643 Rusko); Mikhail SHUGAY (643 Rusko); Vasileios BIKOS (300 Řecko, domácí); Evgeny EGOROV (643 Rusko, domácí); V. I. KIRGIZOVA (643 Rusko); E. M. MERZLYAK (643 Rusko); D. B. STAROVEROV (643 Rusko); D. A. BOLOTIN (643 Rusko); Ilgar MAMEDOV (643 Rusko, domácí); Mark IZRAELSON (643 Rusko, domácí); M. D. LOGACHEVA (643 Rusko); O. KLADOVA (643 Rusko); Karla PLEVOVÁ (203 Česká republika, domácí); Šárka POSPÍŠILOVÁ (203 Česká republika, domácí) a Dmitriy CHUDAKOV (643 Rusko, garant, domácí)
Vydání
NATURE PROTOCOLS, LONDON, NATURE PUBLISHING GROUP, 2016, 1754-2189
Další údaje
Jazyk
angličtina
Typ výsledku
Článek v odborném periodiku
Obor
10600 1.6 Biological sciences
Stát vydavatele
Velká Británie a Severní Irsko
Utajení
není předmětem státního či obchodního tajemství
Odkazy
Impakt faktor
Impact factor: 10.032
Kód RIV
RIV/00216224:14740/16:00088911
Organizační jednotka
Středoevropský technologický institut
UT WoS
000382164800004
EID Scopus
2-s2.0-84981170197
Klíčová slova anglicky
ZEBRAFISH ANTIBODY REPERTOIRE; B-CELL REPERTOIRE; RHEUMATOID-ARTHRITIS; IMMUNE REPERTOIRES; MULTIPLEX PCR; MEMORY; VACCINATION; RESPONSES; REVEALS; DEEP
Štítky
Změněno: 22. 3. 2017 10:08, Mgr. Eva Špillingová
Anotace
V originále
High-throughput sequencing analysis of hypermutating immunoglobulin (IG) repertoires remains a challenging task. Here we present a robust protocol for the full-length profiling of human and mouse IG repertoires. This protocol uses unique molecular identifiers (UMIs) introduced in the course of cDNA synthesis to control bottlenecks and to eliminate PCR and sequencing errors. Using asymmetric 400+100-nt paired-end Illumina sequencing and UMI-based assembly with the new version of the MIGEC software, the protocol allows up to 750-nt lengths to be sequenced in an almost error-free manner. This sequencing approach should also be applicable to various tasks beyond immune repertoire studies. In IG profiling, the achieved length of high-quality sequence covers the variable region of even the longest chains, along with the fragment of a constant region carrying information on the antibody isotype. The whole protocol, including preparation of cells and libraries, sequencing and data analysis, takes 5 to 6 d.
Návaznosti
LQ1601, projekt VaV |
| ||
NV15-30015A, projekt VaV |
|