J 2018

Study of metabolic activity of human embryos focused on amino acids by capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection

CELÁ, Andrea, Aleš MÁDR, Michal JEŠETA, Jana ŽÁKOVÁ, Igor CRHA et. al.

Basic information

Original name

Study of metabolic activity of human embryos focused on amino acids by capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection

Name in Czech

Studium metabolické aktivity lidských embryí zaměřené na aminokyseliny pomocí kapilární elektroforézy s fluorescenční detekcí

Authors

CELÁ, Andrea (203 Czech Republic, belonging to the institution), Aleš MÁDR (203 Czech Republic, belonging to the institution), Michal JEŠETA (203 Czech Republic, belonging to the institution), Jana ŽÁKOVÁ (203 Czech Republic, belonging to the institution), Igor CRHA (203 Czech Republic, belonging to the institution) and Zdeněk GLATZ (203 Czech Republic, guarantor, belonging to the institution)

Edition

Electrophoresis, Weinheim, Verlag Chemie, 2018, 0173-0835

Other information

Language

English

Type of outcome

Článek v odborném periodiku

Field of Study

10608 Biochemistry and molecular biology

Country of publisher

Germany

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

References:

Impact factor

Impact factor: 2.754

RIV identification code

RIV/00216224:14310/18:00101108

Organization unit

Faculty of Science

UT WoS

000451894000012

Keywords in English

Amino acids; Capillary electrophoresis with light emitting diode induced fluorescence detection;

Tags

International impact, Reviewed
Změněno: 23/4/2024 12:24, Mgr. Michal Petr

Abstract

V originále

Assisted reproduction is a quickly developing field of reproductive medicine whose importance is growing every year due to the increasing number of patients suffering from infertility. As a result, there is a need for the continuous development and/or improvement of assisted reproductive technologies. This paper presents a new method for the in vitro measurement of the amino acid turnover of developing embryos based on capillary electrophoresis with light-emitting diode-induced fluorescence detection. Amino acids were derivatized with naphthalene-2,3-dicarboxaldehyde/NaCN, and the resulting fluorescent derivatives were baseline resolved within 25 min in a background electrolyte comprised of 50 mM sodium tetraborate, 73 mM sodium dodecyl sulphate, 5 mM sodium deoxycholate and 2.5 mM (2 hydroxypropyl)-beta cyclodextrin (pH 9.3). The migration time and the peak area repeatability (n = 10) were below 0.5 % and 4.3 %, respectively. The limits of detection ranged from 12.6 nM (histidine) to 39.3 nM (taurine). The developed method, which only requires 2 ul of raw sample, was successfully applied for determining the metabolic activity of human embryos exposed to different environmental stress conditions.

In Czech

Asistovaná reprodukce je rychle se rozvíjející oblast reprodukční medicíny, jejíž důležitost se zvyšuje každým rokem v důsledku rostoucího počtu párů trpících neplodností. Důsledkem toho je třeba neustálého vývoje a/nebo zlepšování technik využívaných v asistované reprodukci. Tento článek uvádí novou metodu pro sledování metabolického obratu aminokyselin u lidských embryí vyvíjejících se in vitro založenou na kapilární elektroforéze s fluorescenční detekcí. Obsažené aminokyseliny byly derivatizovány naftalen-2,3-dikarboxaldehydem v přítemnosti NaCN a vzniklé fluorescenční deriváty byly separovány s rozlišením k základní linii do 25 minut v základním elektrolytu obsahujícím 50 mM tetraboritan disodný, 73 mM dodecylsulfát sodný, 5 mM deoxycholát sodný a 2,5 mM (2 hydroxypropyl)-betacyklodextrin (pH 9.3). Opakovatelnosti (n = 10) migračních časů a ploch píků byly pod 0,5 %, respektive 4,3 %. Limity detekce se pohybovaly od 12,6 nM (histidin) do 39,3 nM (taurin). Vyvinutá metoda, která vyžaduje pouze 2 ul vzorku, byla úspěšně aplikována pro stanovení metabolické aktivity lidských embryí vystavených různým kultivačním podmínám.

Links

GBP206/12/G014, research and development project
Name: Centrum pokročilých bioanalytických technologií