a 2020

Rola katechol-O-metyltransferázy u estrogén-receptor pozitívnych nádorov prsníka

JANÁČOVÁ, Lucia, Petr LAPČÍK, Anna POSPÍŠILOVÁ, David POTĚŠIL, Jan PŘIBYL et. al.

Basic information

Original name

Rola katechol-O-metyltransferázy u estrogén-receptor pozitívnych nádorov prsníka

Name in Czech

Rola katechol-O-metyltrasnerázy u estrogen-receptor-pozitivních nádorů prsu

Name (in English)

The role of catechol-O-methyltransferase in estrogen-receptor-positive breast tumours

Authors

Edition

Neformální proteomický webinář, 27.11.2020, in Book of Abstracts, p. 9. 2020. 2020

Other information

Type of outcome

Konferenční abstrakt

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

References:

Změněno: 27/1/2021 16:28, doc. Mgr. Pavel Bouchal, Ph.D.

Abstract

V originále

Enzým katechol-O-metyltransferáza (COMT) hrá zásadnú úlohu pri detoxikácii katechol estrogénov prenosom metylovej skupiny z S-adenosyl-L-metionínu na estrogénové metabolity, čím zabraňuje ich oxidácii na karcinogénne chinóny. Na základe tejto enzýmovej aktivity sme vytvorili hypotézu o tumor supresorovej úlohe COMT u estrogén receptor (ER) dependentných nádorov prsníka. V tejto štúdii sme sa zamerali na pochopenie dôsledkov zvýšenej expresie COMT na fenotyp nádorových buniek odvodených od ER+ nádorov prsníka pomocou metód systémovej biológie. Pre štúdiu sme vytvorili bunkovú líniu MCF-7 stabilne transdukovanú sekvenciami kódujúcimi COMT a zelený fluorescenčný proteín (GFP)(MCF7-COMT-GFP), líniu MCF7-GFP sme použili ako kontrolnú. Invazivitu oboch línií sme porovnali pomocou Transwell assay, ktorá odhalila zníženú invazívnu kapacitu línie MCF7-COMT voči kontrole. Analýza MCF7-COMT buniek pomocou mikroskopie atómových síl ukázala ich zvýšenú tuhosť, v súlade s ich epiteliálnym fenotypom. Výsledky experimentov na bunkovej úrovni sme doplnili kombináciou proteomiky v data independent acquisition (DIA) móde na platforme Orbitrap Fusion Lumos (Thermo Scientific) a transkriptomiky (RNA-Seq) na platforme Illumina Next-Seq. Medzi najvýznamnejšie koregulované gény a proteíny patrí zvýšená hladina metántioloxidázy spájanej s lepším prežitím u pacientov s ER+ nádormi prsníka a znížená expresia plastínu-2 zapojeného do tumorigenézy a migrácie nádorových buniek. Analýza proteínových interakcií COMT odhalila 22 proteínov zapojených do regulácie bunkovej adhézie a motility, redoxnej homeostázy, transmembránového transportu a metabolizmu. Novo identifikovaná interakcia COMT s inhibítorom proteázy Kunitzovho typu 2 (SPINT2), ktorý inhibuje bunkový rast, adhéziu a motilitu skrz aktivátor hepatocytového rastového faktora (HGF), naznačuje ďalší súvisiaci mechanizmus pôsobenia COMT ako tumor supresora v ER+ nádoroch prsníka. Záverom, v práci sme odhalili mechanizmy súvisiace so zvýšenou hladinou COMT, ktoré podporujú jeho tumor supresorovú úlohu u ER+ nádorov prsníka.

Links

MUNI/A/1252/2019, interní kód MU
Name: Podpora biochemického výzkumu v roce 2020
Investor: Masaryk University, Category A
NV19-08-00250, research and development project
Name: Proteotypová klasifikace renálního karcinomu ve vztahu k prognóze a terapeutické odpovědi
Investor: Ministry of Health of the CR
90127, large research infrastructures
Name: CIISB II