Rola katechol-O-metyltransferázy u estrogén-receptor pozitívnych nádorov prsníka

JANÁČOVÁ, Lucia, Petr LAPČÍK, Anna POSPÍŠILOVÁ, David POTĚŠIL, Jan PŘIBYL, Roman HRSTKA, Eva BUDINSKÁ, Petr MÜLLER and Pavel BOUCHAL. Rola katechol-O-metyltransferázy u estrogén-receptor pozitívnych nádorov prsníka (The role of catechol-O-methyltransferase in estrogen-receptor-positive breast tumours). In Neformální proteomický webinář, 27.11.2020, in Book of Abstracts, p. 9. 2020. 2020.

Basic information

• Original name: Rola katechol-O-metyltransferázy u estrogén-receptor pozitívnych nádorov prsníka
• Name in Czech: Rola katechol-O-metyltrasnerázy u estrogen-receptor-pozitivních nádorů prsu
• Name (in English): The role of catechol-O-methyltransferase in estrogen-receptor-positive breast tumours
• Authors: JANÁČOVÁ, Lucia, Petr LAPČÍK, Anna POSPÍŠILOVÁ, David POTĚŠIL, Jan PŘIBYL, Roman HRSTKA, Eva BUDINSKÁ, Petr MÜLLER and Pavel BOUCHAL.
• Edition: Neformální proteomický webinář, 27.11.2020, in Book of Abstracts, p. 9. 2020. 2020.

Other information

• Type of outcome: Conference abstract
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• WWW: URL

Abstract

Enzým katechol-O-metyltransferáza (COMT) hrá zásadnú úlohu pri detoxikácii katechol estrogénov prenosom metylovej skupiny z S-adenosyl-L-metionínu na estrogénové metabolity, čím zabraňuje ich oxidácii na karcinogénne chinóny. Na základe tejto enzýmovej aktivity sme vytvorili hypotézu o tumor supresorovej úlohe COMT u estrogén receptor (ER) dependentných nádorov prsníka. V tejto štúdii sme sa zamerali na pochopenie dôsledkov zvýšenej expresie COMT na fenotyp nádorových buniek odvodených od ER+ nádorov prsníka pomocou metód systémovej biológie. Pre štúdiu sme vytvorili bunkovú líniu MCF-7 stabilne transdukovanú sekvenciami kódujúcimi COMT a zelený fluorescenčný proteín (GFP)(MCF7-COMT-GFP), líniu MCF7-GFP sme použili ako kontrolnú. Invazivitu oboch línií sme porovnali pomocou Transwell assay, ktorá odhalila zníženú invazívnu kapacitu línie MCF7-COMT voči kontrole. Analýza MCF7-COMT buniek pomocou mikroskopie atómových síl ukázala ich zvýšenú tuhosť, v súlade s ich epiteliálnym fenotypom. Výsledky experimentov na bunkovej úrovni sme doplnili kombináciou proteomiky v data independent acquisition (DIA) móde na platforme Orbitrap Fusion Lumos (Thermo Scientific) a transkriptomiky (RNA-Seq) na platforme Illumina Next-Seq. Medzi najvýznamnejšie koregulované gény a proteíny patrí zvýšená hladina metántioloxidázy spájanej s lepším prežitím u pacientov s ER+ nádormi prsníka a znížená expresia plastínu-2 zapojeného do tumorigenézy a migrácie nádorových buniek. Analýza proteínových interakcií COMT odhalila 22 proteínov zapojených do regulácie bunkovej adhézie a motility, redoxnej homeostázy, transmembránového transportu a metabolizmu. Novo identifikovaná interakcia COMT s inhibítorom proteázy Kunitzovho typu 2 (SPINT2), ktorý inhibuje bunkový rast, adhéziu a motilitu skrz aktivátor hepatocytového rastového faktora (HGF), naznačuje ďalší súvisiaci mechanizmus pôsobenia COMT ako tumor supresora v ER+ nádoroch prsníka. Záverom, v práci sme odhalili mechanizmy súvisiace so zvýšenou hladinou COMT, ktoré podporujú jeho tumor supresorovú úlohu u ER+ nádorov prsníka.

Links

• MUNI/A/1252/2019, interní kód MU: Name: Podpora biochemického výzkumu v roce 2020

Investor: Masaryk University, Category A

• NV19-08-00250, research and development project: Name: Proteotypová klasifikace renálního karcinomu ve vztahu k prognóze a terapeutické odpovědi

Investor: Ministry of Health of the CR

• 90127, large research infrastructures: Name: CIISB II