p 2021

Úloha cytotoxických gamma-delta T buněk na terapeutické rezistenci a recidivě Glioblastoma Multiforme

KNIGHT, Andrea, Barbora KOHLOVÁ, Martin PISKÁČEK, Vít ZMÁTLO, Marie TOMANDLOVÁ et. al.

Basic information

Original name

Úloha cytotoxických gamma-delta T buněk na terapeutické rezistenci a recidivě Glioblastoma Multiforme

Name (in English)

Role of cytotoxic gamma-delta T cells in therapeutic resistance and recurrence of Glioblastoma Multiforme

Authors

Edition

XLV. Brněnské onkologické dny, 2021

Other information

Language

Czech

Type of outcome

Vyžádané přednášky

Field of Study

30204 Oncology

Country of publisher

Czech Republic

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

Organization unit

Faculty of Medicine
Změněno: 21/12/2021 08:24, Mgr. Tereza Miškechová

Abstract

V originále

Gamma-delta (γδ) T lymfocyty patří mezi významné efektorové buňky přirozené imunity s prokázanou protinádorovou reaktivitou proti agresivnímu nádoru mozku glioblastoma multiforme (GBM) (Knight et al., PLoS One 2013). Terapeutické přístupy imunoterapie GBM mají omezenou úspěšnost, zejména v důsledku ochranné bariéry mozku a imunosupresivního mikroprostředí nádoru. Cílem projektu je detailní analýza Vδ1 a Vδ2 populací γδ T lymfocytů infiltrovaných v nádorové tkáni a párových vzorcích periferní krve pacientů GBM. V projektu je zařazeno 33 pacientů GBM; 16 žen (48%) a 17 mužů (52%), medián věku pacientů byl 60 let (rozmezí 33-80let). Všichni pacienti byli operování na Neurochirurgické klinice FN Brno se snahou o maximální možnou cytoredukci a získání reprezentativních vzorků patologické tkáně. Po operaci byla u pacientů v Neuroonkologickém centru Brno na Neuroonkologické komisi MOÚ indikována komplexní onkologická terapie zahrnující standardní terapii podle Stuppova protokolu tj. konkomitantní chemo-radioterapií a adjuvantní chemoterapii temozolomidem, která včetně paliativních režimů probíhá na Klinice radiační onkologie a Klinice komplexní onkologické péče Masarykova onkologického ústavu. Populace CD3+Vδ1 γδ T buněk byla určena u zdravých dárců (HD, n=35, medián věku je 61 let) v periferní krvi průtokovou cytometrií v rozmezí 0,1-6,5% (medián 1,8%), CD3+Vδ2 γδ T lymfocyty u HD stanoveny v rozmezí 0,3-12,5% (medián 3,6%). U GBM pacientů byl nalezen signifikantní nárůst Vδ1 γδ T buněk (P<0,01) ve srovnání se zdravými dárci. Vδ2 γδ T buňky byly u GBM pacientů sníženy (P<0,05). Vzorky tumorů zpracováváme pomocí enzymatických kitů (disociátor Miltenyi), buněčné suspenze jsou analyzovány průtokovou cytometrií pro stanovení exprese receptorů NKG2D, DNAM1, TIGIT, PD-1 a Tim3. Nádorové buňky jsou fenotypovány protilátkami stresových ligandů MICA/B, ULBP a CD122, CD155. Dále jsme demonstrovali cytotoxickou reaktivitu γδ T lymfocytů vůči nádorovým liniím U251 a U373, a zejména vůči primárním nádorovým buňkám. Popsali jsme významnou úlohu EphA2 tyrosin kinázy v interakcích s Vδ1 T lymfocyty. Blokováním exprese EphA2 protilátkou a pomocí inhibitoru ALW-II-41-27 jsme pozorovali významné snížení specifické cytotoxicity. Analýza solubilních proteinů v plazmě pacientů metodou Luminex určila významně zvýšené hladiny MICA, check-point inhibitoru B7-H3 (CD276) a PD-L1 (B7-H1, CD274).

Links

NV19-05-00410, research and development project
Name: Úloha cytotoxických gamma-delta T buněk na terapeutické rezistenci a recidivě Glioblastoma Multiforme
Investor: Ministry of Health of the CR