HPLC-FLD Method Development for the Determination of Alpelisib in Human Plasma

KREJČÍŘOVÁ, Eva, Marta PELCOVÁ, Jan JUŘICA and Zdeněk GLATZ. HPLC-FLD Method Development for the Determination of Alpelisib in Human Plasma. 2023.

Basic information

• Original name: HPLC-FLD Method Development for the Determination of Alpelisib in Human Plasma
• Name in Czech: Vývoj FPLC-FLD metody pro stanovení alpelisibu z lidské plasmy
• Authors: KREJČÍŘOVÁ, Eva, Marta PELCOVÁ, Jan JUŘICA and Zdeněk GLATZ.
• Edition: 2023.

Other information

• Original language: English
• Type of outcome: Conference abstract
• Country of publisher: Czech Republic
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• Organization unit: Faculty of Science
• Keywords (in Czech): alpelisib, plasma, HPLC, fluorescence, extrakce
• Keywords in English: Alpelisib, plasma, HPLC, fluorescence, extraction

Abstract

Alpelisib (ALP) is a selective phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) inhibitor approved for breast cancer treatment. Dysregulation of the PI3K signal pathway is involved in progression of cancer and is therefore a target for antineoplastic therapy. Another indication approved only in the United States is the treatment of severe manifestations of PIK3CA-Related Overgrowth Spectrum, including venous malformations. ALP exposure shows considerable inter-individual variability and adverse effects and therefore therapeutic drug monitoring (TDM) is beneficial. Fluorescence detection is a more affordable alternative to LC-MS/MS methods and provides sufficient sensitivity for TDM and pharmacokinetic profiling. After optimizing the HPLC-FLD separation conditions, a suitable liquid-liquid extraction procedure was tested. The highest extraction yield was obtained with a mixture of dichloromethane-isopropanol, 9:1 (v/v). The method was validated according to the European Medicines Agency guidelines. The developed HPLC-FLD method was applied to determine ALP in patient plasma samples. The obtained concentrations were within the chosen calibration range (10–1000 ng/mL). This method is sensitive enough for the TDM of ALP in human plasma even for non-standard dosing schedules (e.g. off label use, children).

Abstract (in Czech)

Alpelisib je selektivní inhibitor fasfatidylinositol 3-kinasy (PI3K) schválený pro léčbu karcinomu prsu. Dysregulace PI3K signální dráhy se spoluúčastní rozvoje rakoviny a je tak vhodným teraputickým cílem antineoplastické léčby. Jinou, alternativní oblastí indikace schválenou toho času pouze v USA je léčba závažných projevů mutace PI3K-katalytické podjetky alfa (PIK3CA-Related Overgrowth Spectrum) zahrnující venózní malformace. Užívání ALP vykazuje výraznou interindividuální variabilitu a vedlejší účinky a tak terapeutické sledování léčby (TDM) je užitečné. Fluorescenční detekce je lépe dostupnou alternativou k Lc-MS/MS metodám a přitom poskytuje dostatečnou citlivost pro TDMa farmakokinetické profilování. Po optimalizaci HPLC-FLD separačních podmínek byl testován vhodný extrační postup. Nejvyšší účinnsot extrakce byla získána pro směs dichlormethan-isopropanol (9:1, v/v). Metoda byla validována podle EMA doporuční. Vyvinutá HPLC-FLD metoda byla aplikována na stanovení ALP z plasmy pacientů. Naměřené koncentrace spadaly do zvoleného kalibračního rozsahu (10–1000 ng/mL). Prezentovaná metoda je dostatečně citlivá pro TDM ALP z plasmy i při nestandardním dávkování (např. off-label, u dětí).