Změny neuronální elektrické aktivity pod vlivem glutamátu a snížené exprese miR-142-5p

POLEDŇÁKOVÁ, Anna, Zita GOLIÁŠOVÁ, Olga ŠVECOVÁ, Martin KRÁL, Milan BRÁZDIL and Markéta BÉBAROVÁ. Změny neuronální elektrické aktivity pod vlivem glutamátu a snížené exprese miR-142-5p (Changes of neuronal electrical activity under the effect of glutamate and lower expression of miR-142-5p). In 99. Fyziologické dny. 2024.

Basic information

• Original name: Změny neuronální elektrické aktivity pod vlivem glutamátu a snížené exprese miR-142-5p
• Name (in English): Changes of neuronal electrical activity under the effect of glutamate and lower expression of miR-142-5p
• Authors: POLEDŇÁKOVÁ, Anna, Zita GOLIÁŠOVÁ, Olga ŠVECOVÁ, Martin KRÁL, Milan BRÁZDIL and Markéta BÉBAROVÁ.
• Edition: 99. Fyziologické dny, 2024.

Other information

• Original language: Czech
• Type of outcome: Conference abstract
• Country of publisher: Slovakia
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• Organization unit: Faculty of Medicine
• Keywords (in Czech): epilepsie, miRNA, miR-142-5p, antagomir, glutamát, hipokampální neurony
• Keywords in English: epilepsy, miRNA, miR-142-5p, antagomir, glutamate, hippocampal neurons

Abstract

Úvod: Glutamát, hlavní excitační neurotransmiter v CNS, může být dle některých studií využit k navození epilepsie in vitro. Do rozvoje epilepsie rovněž zasahují změny exprese některých miRNA včetně miR-142-5p, což z nich činí možný terapeutický cíl. Cílem tohoto pilotního projektu bylo zhodnotit účinek specifického inhibitoru (antagomiru) proti miR-142-5p na neuronální aktivitu, ať už spontánní či navýšenou prostřednictvím glutamátu. Metodika: Měření elektrické aktivity hipokampálních neuronů izolovaných z neonatálních potkanů jsme prováděli pomocí techniky multielectrode array (MEA) od 7. dne in vitro (DIV) při vzorkovací frekvenci 25 kHz. DIV 13 byl do vybrané skupiny MEA čipů aplikován 10 μM glutamát (10-min aplikace s následným výplachem) a 6 dnů před plánovaným ukončením snímání jsme aplikovali 30 nM antagomir pro snížení exprese miR-142-5p (následuje měření 1., 2. a 5. den po jeho aplikaci). Analyzované parametry zahrnují frekvenci hrotových potenciálů (spiků) a počet aktivních elektrod. Výsledky: Během kultivace došlo k signifikantnímu nárůstu frekvence spiků i počtu aktivních elektrod jak u kontrolních MEA čipů, tak u čipů s přechodnou aplikací glutamátu (n=7, P0,05, resp. n=8, P0,01), avšak nebyl patrný rozdíl mezi kontrolou a glutamátem. Frekvence spiků po aplikaci 30 nM antagomiru vykazovala nesignifikantní sestupný trend, zatímco u kontrol nebyl obdobný pokles patrný; počet aktivních elektrod byl stabilní. Závěr: Dle našich dosavadních dat nelze přechodnou aplikaci glutamátu využít jako model epilepsie in vitro. Pilotní data poukazují na možný inhibiční vliv antagomiru proti miR-142-5p na spontánní elektrickou aktivitu neuronů. Pokud toto potvrdí i finální data, bude možné zvážit snížení exprese této miRNA jako alternativní léčbu farmakorezistentní epilepsie.

Links

• GA23-05274S, research and development project: Name: Terapeutická modulace exprese miRNA u epilepsie: dopad na excitabilitu a jiné procesy v mozku

Investor: Czech Science Foundation, Therapeutic miRNA targeting in epilepsy impact on excitability and beyond

• MUNI/A/1343/2022, interní kód MU: Name: Zátěže kardiovaskulárního systému od A po Z

Investor: Masaryk University, Loads on the cardiovascular system from A to Z

• MUNI/A/1547/2023, interní kód MU: Name: Analýza (dys)funkce: od molekul k živému organismu

Investor: Masaryk University, Analysis of (dys)function: from molecules to the living organism