D 2003

Detekce a lokalizace genetických determinant faktorů virulence u Staphylococcus aureus pomocí molekulárních sond

MICHALOVÁ, Eva, Vladislava RŮŽIČKOVÁ and Helena HRADECKÁ

Basic information

Original name

Detekce a lokalizace genetických determinant faktorů virulence u Staphylococcus aureus pomocí molekulárních sond

Name (in English)

Detection and localization of virulence factor determinants in Staphylococcus aureus using molecular probes

Authors

MICHALOVÁ, Eva (203 Czech Republic), Vladislava RŮŽIČKOVÁ (203 Czech Republic, guarantor) and Helena HRADECKÁ (203 Czech Republic)

Edition

7. vyd. Brno, VII Pracovní setkání biochemiků a molekulárních biologů, p. 53-53, 2003

Publisher

Přírodovědecká fakulta Masarykovy univerzity v Brně

Other information

Language

Czech

Type of outcome

Stať ve sborníku

Field of Study

Genetics and molecular biology

Country of publisher

Czech Republic

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

RIV identification code

RIV/00216224:14310/03:00009863

Organization unit

Faculty of Science

ISBN

80-210-3053-4

Keywords in English

Staphylococcus; virulence factors; molecular probes; PCR
Změněno: 28/5/2003 10:45, doc. RNDr. Vladislava Růžičková, CSc.

Abstract

V originále

Alimentární enterotoxikózy, toxické epidermolýzy anebo syndrom toxického šoku jsou onemocnění způsobená toxickými exolátkami, produkovanými patogenními kmeny S. aureus. V této práci byly Southernovou hybridizací s digoxigeninem značenými molekulárními sondami, připravenými v PCR, lokalizovány sekvence genů kódujících enterotoxiny B, C1 a C2,3, exfoliatin A a termostabilní nukleázu (TN) na restrikčních spektrech HindIII a EcoRI nebo na makrorestrikčním spektru SmaI. Gen seb byl u všech SEB-pozitivních kmenů lokalizován v EcoRI spektru ve dvou kopiích na fragmentech 1,5-kb a 3,6-kb nebo 8,6-kb; v HindIII spektru pak většinou na fragmentu 6,1-kb, zatímco ve SmaI spektru se tento gen vyskytoval na různých fragmentech. Gen sec1 byl lokalizován nejčastěji na EcoRI fragmentu 8,5-kb a na HindIII fragmentu 5,0-kb. Ve SmaI spektru byl sec1 potvrzen na fragmentech ~44-kb, ~23-kb nebo ~74-kb. Gen eta byl u ETA-pozitivních kmenů většinou lokalizován na těchto fragmentech: SmaI ~200-kb, EcoRI 4,9 a 2,5-kb a na HindIII 6,2 a 4,2-kb. Gen sec2,3 byl zjištěn na větším počtu EcoRI a HindIII fragmentů a ve SmaI spektru pak nejčastěji na fragmentech ~44-kb a ~100-kb. Výskyt většího počtu signálů indikuje více kopií sekvencí genů kódujících enterotoxiny B a C. Hybridizací nebyla prokázána přítomnost genů seb, sec1 a sec2,3 na plazmidové DNA. Gen nuc, kódující termonukleázu, byl lokalizován na SmaI fragmentech ~280-kb až ~370-kb. Hybridizace kolonií umožnila detekovat přítomnost genu sec1 přímo v genomu bakterií vyrostlých v koloniích na živném agarovém médiu. Bylo prokázáno, že hybridizace genomové DNA se specifickou molekulární sondou vhodně doplňuje a upřesňuje molekulární diagnostiku virulentních kmenů S. aureus.

In English

Alimentary enterotoxicoses, toxic epidermolyses or toxic shock syndrome toxin are caused by oxic exoproducts of the pathogenic strains of Staphylococcus aureus. In this paper Southern blott and hybridization with specific probes for the detection SEs (B, C;) ETA and Tnase are demostrated in the HindIII a EcoRI and SmaI macrorestriction spectra. By this method localization of the genes for these toxins were detected in staphylococcal genomes.

Links

MSM 143100008, plan (intention)
Name: Genomy a jejich funkce
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Genomes and their functions