D 2003

Stanovení malondialdehydu v biologických vzorcích pomocí kapalinové chromatografie

TOMANDL, Josef and Zdeněk GLATZ

Basic information

Original name

Stanovení malondialdehydu v biologických vzorcích pomocí kapalinové chromatografie

Authors

TOMANDL, Josef (203 Czech Republic, guarantor) and Zdeněk GLATZ (203 Czech Republic)

Edition

Bratislava, Proceeding of 15th International Conference "Chromatographic Methods and Human Health" p. 66-66, 1 pp. 2003

Publisher

Slovenská chemická společnost

Other information

Language

English

Type of outcome

Stať ve sborníku

Field of Study

10600 1.6 Biological sciences

Country of publisher

Slovakia

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

RIV identification code

RIV/00216224:14110/03:00008403

Organization unit

Faculty of Medicine

ISSN

Keywords in English

Malondialdehyde HPLC

Tags

Změněno: 19/5/2009 18:44, prof. RNDr. Zdeněk Glatz, CSc.

Abstract

V originále

Malondialdehyd (MDA) je pro živé systémy vysoce toxickou látkou. Vzniká jako sekundární produkt při peroxidaci polynenasycených mastných kyselin. Jeho množství odráží intenzitu neenzymové peroxidace lipidů, probíhající radikálovou reakcí iniciovanou reaktivními formami kyslíku, ale i míru aktivace enzymové peroxidace, probíhající při biosyntéze ikosanoidů. Ve vodném prostředí se MDA vyskytuje v různých formách v závislosti na hodnotě pH, v biologických vzorcích je zastoupen jako volný nebo vázaný na proteiny. MDA lze stanovit přímo nebo po jeho derivatizaci, nejběžněji s thiobarbiturovou kyselinou (TBA) za vzniku komplexu MDA(TBA)2 (viz obr.), který lze detekovat fotometricky při 532 nm nebo spektrofluorimetricky. V komplexní matrici, jakou je např. plazma, se však vyskytuje nebo během vlastní derivatizace vzorku vzniká celá řada interferujících látek. Proto již byla pro zvýšení specifičnosti i senzitivity stanovení vyvinuta řada metodik a technik eliminující tyto interferující látky. Nicméně, získané výsledky pomocí těchto často náročných postupů jsou mnohdy totožné jako při použití jednoduchých spektrofotometrických metod. Cílem této studie bylo vypracovat jednoduchou a reprodukovatelnou metodiku pro stanovení celkového MDA v lidské plazmě a v moči. Byly optimalizovány podmínky derivatizace a separace na reverzně-fázových kolonách pomocí HPLC s fluorescenční i UV detekcí. Hodnoty získané pomocí HPLC metody byly v porovnání se spektrofotometrickou metodou signifikantně nižší, nicméně v dobré korelaci. Metoda byla ověřena a použita v klinickém výzkumu.

Links

GA203/02/1447, research and development project
Name: Kapilární elektrochromatografie v lineárních a planárních mikrostrukturách s využitím polymerních náplní
Investor: Czech Science Foundation, Capillary electrochromatography in linear and planar microstructures using polymer beds