J 2004

Generation of Dendritic Cells Using Cell Culture Bags - Description of a Method and Review of Literature.

BÜCHLER, Tomáš, Lucie KOVÁŘOVÁ, Romana MUSILOVÁ, Ludmila BOURKOVÁ, Darina OČADLÍKOVÁ et. al.

Basic information

Original name

Generation of Dendritic Cells Using Cell Culture Bags - Description of a Method and Review of Literature.

Name in Czech

Příprava dendritických buněk s použitím kultivačních vaků - popis metody a shrnutí literatury.

Authors

BÜCHLER, Tomáš (703 Slovakia, guarantor), Lucie KOVÁŘOVÁ (203 Czech Republic), Romana MUSILOVÁ (203 Czech Republic), Ludmila BOURKOVÁ (203 Czech Republic), Darina OČADLÍKOVÁ (203 Czech Republic), Alena BULIKOVÁ (203 Czech Republic), Libor HANÁK (203 Czech Republic), Jaroslav MICHÁLEK (203 Czech Republic) and Roman HÁJEK (203 Czech Republic)

Edition

Hematology, 2004, 1024-5332

Other information

Language

English

Type of outcome

Článek v odborném periodiku

Field of Study

30102 Immunology

Country of publisher

United Kingdom of Great Britain and Northern Ireland

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

RIV identification code

RIV/00216224:14110/04:00012305

Organization unit

Faculty of Medicine

Keywords in English

dendritic cells; bag culture; closed system; cellular vaccine; immunotherapy
Změněno: 23/6/2009 09:20, Jana Křivá

Abstract

V originále

Anticancer immunotherapy using dendritic cell-based vaccines is a strategy aimed at the induction and maintenance of immune responses against cancer cells.Clinical applications of dendritic cells (DCs) require stringent adherence to Good Manufacturing Practice (GMP) methods and rigorous standardization of DC-based vaccine preparation. Recently,closed systems for DC culture have been developed with a goal to minimize the risk of contamination.Here,we compare the yield,immunophenotype, and functional properties of DCs generated in Lifecell X-Fold culture bags and in plastic wells, both from adherence-selected monocytes, and review the current literature on closed systems for DC generation. We found that both the overall yield and the yield of CD83+ cells in cell culture bags was lower than in the standard culture method. No statistically significant differences were observed in the expression of DC immunophenotypic markers. The capability of DCs cultured in bags and in wells to induce the proliferation of allogeneic mononuclear cells were equivalent. The perfotmance of DCs in mixed lymphocyte reaction correlated significantly (p=0.005) with the CD83 expression but not with the CD80, CD86, HLA-DR, CD1a, and CD1c expression. We conclude that the immunophenotype and stimulatory properties of DCs cultured in closed cell culture bags are similar to those generated by conventional method using cell culture wells.

In Czech

Protinádorová terapie používající vakcíny na bázi dendritických buněk je strategie směřovaná na vyvolání a udržení imunitních odpovědí vůči nádorovým buňkám. Klinické aplikace dendritických buněk (DB) vyžadují přísné dodržování postupů Správné výrobní praxe (GMP) a standardizace přípravy vakcín založených na DB. V poslední době byly vyvinuty uzavřené systémy pro DB kultivaci s cílem minimalizovat riziko kontaminace. V této práciporovnáváme výtěžek, imunofenotyp a funkční vlastnosti DB připravených z adherentních monocytů v Lifecell X-Fold kultivačních vacích a umělohmotných destičkách, a podáváme přehled současné literatury o přípravě DB v uzavřených systémech. Zjistili jsme, že celkový výtěžek a výtěžek CD83+ buněk v kultivačních vacích byl nižší než při klasické kultivaci.Nebyly pozorovány žádné statisticky významné rozdíly v expresi DB imunofenotypických markerů. Schopnosti DB připravených v kultivačních vacích nebo destičkách vyvolat proliferaci allogenních buněk byly shodné. Výkonnost DB ve smíšené lymfocytární reakci významně korelovala (p=0.005) s CD83 expresí, ale ne s expresí CD80, CD86, HLA-DR, CD1a a CD1c. Usuzujeme, že imunofenotypové a stimulační vlastnosti DB pěstovaných v uzavřených kultivačních vacích jsou podobné těm, které vznikly po přípravě DB konvečními metodami s použitím kultivačních destiček.

Links

NC7475, research and development project
Name: Hodnocení buněčné imunity a molekulární analýza myelom-specifických T lymfocytů u pacientů s mnohočetným myelomem