D 2005

Využití průtokové cytometrie pro sledování proliferace a diferenciace monoblastů transformovaných onkogenem v-myb

NAVRÁTILOVÁ, Jarmila, Viktor HORVÁTH, Antonín LOJEK, Bořivoj VOJTĚŠEK, Alois KOZUBÍK et. al.

Basic information

Original name

Využití průtokové cytometrie pro sledování proliferace a diferenciace monoblastů transformovaných onkogenem v-myb

Name in Czech

Využití průtokové cytometrie pro sledování proliferace a diferenciace monoblastů transformovaných onkogenem v-myb

Name (in English)

Use of flow cytometry for exploring proliferation and differentiation of v-myb-transformed monoblasts

Authors

NAVRÁTILOVÁ, Jarmila (203 Czech Republic), Viktor HORVÁTH (203 Czech Republic), Antonín LOJEK (203 Czech Republic), Bořivoj VOJTĚŠEK (203 Czech Republic), Alois KOZUBÍK (203 Czech Republic) and Jan ŠMARDA (203 Czech Republic, guarantor)

Edition

Červenohorské sedlo, Analytická cytometrie III, p. 150-151, 2 pp. 2005

Publisher

Česká společnost pro analytickou cytologii

Other information

Language

Czech

Type of outcome

Stať ve sborníku

Field of Study

Genetics and molecular biology

Country of publisher

Czech Republic

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

RIV identification code

RIV/00216224:14310/05:00012513

Organization unit

Faculty of Science

ISBN

80-239-5155-6

Keywords in English

p53; myb; differentiation; proliferation; apoptosis; flow cytometry
Změněno: 21/12/2006 12:22, prof. RNDr. Jan Šmarda, CSc.

Abstract

V originále

Cílem naší práce bylo určit, zda lze v leukemických buňkách eliminovat transformační funkci onkoproteinu v-Myb lidským proteinem p53. Za tímto účelem jsme v monoblastech BM2 exprimovali cDNA lidského genu p53 a vyhodnotili důsledky tohoto zásahu pro jejich fenotyp. Zvýšení hladiny p53 způsobilo zastavení proliferace buněk BM2 ve fázi G2 buněčného cyklu. Současně buňky BM2 exprimující p53 získaly schopnost diferenciace do stádia vykazujícího zvýšenou míru adherence, fagocytární aktivity, tvorby kyslíkových radikálů a aktivity alfa-naftyl acetát esterázy. Zaznamenali jsme rovněž snížení nitrobuněčného pH a částečné zvýšení tvorby povrchového integrinu CD11b. Všechny tyto vlastnosti dokazují, že indukcí exprese p53 bylo navozeno zrání monoblastů do stádia monocytů, Vystavení buněk BM2 exprimujících p53 kyselině retinové způsobilo jejich další diferenciaci do stadia makrofágů. Naše výsledky dokumentují, že nádorový supresor p53 je dominantní vzhledem k onkoproteinu v-Myb, mění jeho aktivitu v transformovaných buňkách a umožňuje tak obnovení jejich přirozené diferenciační schopnosti.

In English

The aim of this work was to determine whether transforming function of the v-myb oncogene can be suppressed by human p53. Therefore, BM2 monoblasts were transfected with cDNA coding for human p53 and the role of this protein in BM2 cells was addressed. p53 protein induced growth arrest in G2 phase of the cell cycle. At the same time, BM2 cells expressing p53 resumed differentiation capacity as documented by increased cell adherence, phagocytic activity, oxygen radical formation and alpha-naphtylactetate esterase activity. In addition, intracellular pH was decreased and amount of cell surface CD11b integrin was up-regulated in these cells. These results document that p53 induces maturing of BM2 monoblasts to monocytes. Once p53-expressing cells are treated with retinoic acid, they undergo maturing to terminal stage of macrophages. Our results show that p53 tumor suppressor is dominant over v-Myb oncoprotein: it changes v-Myb activity in transformed cells and resumes their natural differentiation capability.

Links

GA301/03/1055, research and development project
Name: Studium molekulárních mechanismů způsobujících supresi v-Myb s využitím přístupů proteomiky
Investor: Czech Science Foundation, Study of molecular mechanisms causing v-Myb suppression using proteomics-based approach
MSM0021622415, plan (intention)
Name: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Molecular basis of cell and tissue regulations