TĚŠÍNSKÁ, Iva, Bohuslav RITTICH, Alena ŠPANOVÁ and Milan BARTOŠ. Isolation of PCR-ready DNA from Mycobacterial cells using magnetic particles. In 11th International Symposium on Separation Sciences ISSS 2005. Pardubice, Česká republika: Univerzita Pardubice, 2005, p. 299-299. ISBN 80-7194-771-7.
Other formats:   BibTeX LaTeX RIS
Basic information
Original name Isolation of PCR-ready DNA from Mycobacterial cells using magnetic particles
Name in Czech Izolace mykobakteriální DNA v kvalitě pro PCR pomocí magnetických částic
Authors TĚŠÍNSKÁ, Iva (203 Czech Republic), Bohuslav RITTICH (203 Czech Republic, guarantor), Alena ŠPANOVÁ (203 Czech Republic) and Milan BARTOŠ (203 Czech Republic).
Edition Pardubice, Česká republika, 11th International Symposium on Separation Sciences ISSS 2005, p. 299-299, 1 pp. 2005.
Publisher Univerzita Pardubice
Other information
Original language English
Type of outcome Proceedings paper
Field of Study 10600 1.6 Biological sciences
Country of publisher Czech Republic
Confidentiality degree is not subject to a state or trade secret
RIV identification code RIV/00216224:14310/05:00012824
Organization unit Faculty of Science
ISBN 80-7194-771-7
Keywords in English Mycobacterium; DNA; PCR
Tags DNA, MYCOBACTERIUM, PCR
Changed by Changed by: doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc., učo 1639. Changed: 23/11/2006 08:51.
Abstract
For this study, chicken erythrocyte DNA and calf liver RNA were used. For both types of nucleic acids, we compared the binding capacity of the following particles: non-magnetic particles based on silica, magnetic particles based on ferrite, and magnetic particles P(HEMA-co-GMA) microspheres covered with carboxylic groups. A binding buffer containing 8% PEG and 2M NaCl (final concentration) was shown to be the most appropriate combination for further studies. Separated DNA was eluted using TE buffer. The knowledge acquired was used for the development of a PCR-ready mycobacterial DNA isolation technique. Mycobacterial DNA from the eluate was detected by amplification of the dnaJ gene. The primers Multidnajf and MultidnaJr amplify a product 140 bp long. The sensitivity of the reaction is 5 . 10-3 ng/ul (5.95. 10+2 copies).
Abstract (in Czech)
Byly stanoveny vazebné kapacity DNA z kuřecích erythrocytů a RNA z hovězích jater na následující částice: silikagel, magnetické feritové částice a magnetické P(HEMA-co-GMA)mikročástice obsahující karboxylové skupiny. Jako nejvhodnější vazebný pufr byl zjištěn 8% PEG a 2M NaCl (konečná koncentrace). Z částic byla DNA eluována pomocí TE pufru. Získané znalosti byly využity při izolaci mykobakteriální DNA v kvalitě vhodné pro PCR. Mykobakteriální DNA byla detekována amplifikací genu dnaj. Pomocí primerů Multidnajf a MultidnaJr byl amplifikován produkt o velikosti 140 bp. Citlivost stanovení byla 5,0 x 10-3 ng/ul (5,95 x 10+2 kopií buněk).
Links
GA203/05/2256, research and development projectName: Magnetické hydrofilní polymerní mikročástice reagující na vnější stimuly pro lékařství a bioinženýrství
Investor: Czech Science Foundation, Magnetic stimuli-responsive hydrophilic polymer microspheres for biomedicine/bioengineering
MZE0002716201, plan (intention)Name: Zdravá zvířata a bezpečné potraviny jako základ pro zdraví lidí
PrintDisplayed: 18/7/2024 00:17