Detailed Information on Publication Record
2005
Isolation of PCR-ready DNA from Mycobacterial cells using magnetic particles
TĚŠÍNSKÁ, Iva, Bohuslav RITTICH, Alena ŠPANOVÁ and Milan BARTOŠBasic information
Original name
Isolation of PCR-ready DNA from Mycobacterial cells using magnetic particles
Name in Czech
Izolace mykobakteriální DNA v kvalitě pro PCR pomocí magnetických částic
Authors
TĚŠÍNSKÁ, Iva (203 Czech Republic), Bohuslav RITTICH (203 Czech Republic, guarantor), Alena ŠPANOVÁ (203 Czech Republic) and Milan BARTOŠ (203 Czech Republic)
Edition
Pardubice, Česká republika, 11th International Symposium on Separation Sciences ISSS 2005, p. 299-299, 1 pp. 2005
Publisher
Univerzita Pardubice
Other information
Language
English
Type of outcome
Stať ve sborníku
Field of Study
10600 1.6 Biological sciences
Country of publisher
Czech Republic
Confidentiality degree
není předmětem státního či obchodního tajemství
RIV identification code
RIV/00216224:14310/05:00012824
Organization unit
Faculty of Science
ISBN
80-7194-771-7
Keywords in English
Mycobacterium; DNA; PCR
Tags
Změněno: 23/11/2006 08:51, doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc.
V originále
For this study, chicken erythrocyte DNA and calf liver RNA were used. For both types of nucleic acids, we compared the binding capacity of the following particles: non-magnetic particles based on silica, magnetic particles based on ferrite, and magnetic particles P(HEMA-co-GMA) microspheres covered with carboxylic groups. A binding buffer containing 8% PEG and 2M NaCl (final concentration) was shown to be the most appropriate combination for further studies. Separated DNA was eluted using TE buffer. The knowledge acquired was used for the development of a PCR-ready mycobacterial DNA isolation technique. Mycobacterial DNA from the eluate was detected by amplification of the dnaJ gene. The primers Multidnajf and MultidnaJr amplify a product 140 bp long. The sensitivity of the reaction is 5 . 10-3 ng/ul (5.95. 10+2 copies).
In Czech
Byly stanoveny vazebné kapacity DNA z kuřecích erythrocytů a RNA z hovězích jater na následující částice: silikagel, magnetické feritové částice a magnetické P(HEMA-co-GMA)mikročástice obsahující karboxylové skupiny. Jako nejvhodnější vazebný pufr byl zjištěn 8% PEG a 2M NaCl (konečná koncentrace). Z částic byla DNA eluována pomocí TE pufru. Získané znalosti byly využity při izolaci mykobakteriální DNA v kvalitě vhodné pro PCR. Mykobakteriální DNA byla detekována amplifikací genu dnaj. Pomocí primerů Multidnajf a MultidnaJr byl amplifikován produkt o velikosti 140 bp. Citlivost stanovení byla 5,0 x 10-3 ng/ul (5,95 x 10+2 kopií buněk).
Links
| GA203/05/2256, research and development project |
| ||
| MZE0002716201, plan (intention) |
|