Other formats:
BibTeX
LaTeX
RIS
@inproceedings{621621,
author = {Čejková, Darina and Šmajs, David},
address = {Brno},
booktitle = {Sborník příspěvků IX. Pracovního setkání biochemiků a molekulárních biologů},
keywords = {Treponema pallidum ssp. pallidum; regulation of gene expression},
language = {cze},
location = {Brno},
isbn = {80-210-3635-4},
pages = {5-5},
publisher = {Přírodovědecká fakulta MU},
title = {Identifikace regulátorů genové exprese u Treponema pallidum.},
year = {2005}
}
TY - JOUR
ID - 621621
AU - Čejková, Darina - Šmajs, David
PY - 2005
TI - Identifikace regulátorů genové exprese u Treponema pallidum.
PB - Přírodovědecká fakulta MU
CY - Brno
SN - 8021036354
KW - Treponema pallidum ssp. pallidum
KW - regulation of gene expression
N2 - Metodou real-time RT PCR jsme vyšetřili regulační funkci treponemálních genů rpoN (kódujícího sigma-54 faktor) a fhlA (kódujícího domnělý transkripční faktor). Tyto geny byly naklonovány do expresních plazmidů pBAD/HisB kompatibilních s replikačním systémem BAC. Exprese klonovaných genů byla regulována koncentrací arabinózy v kultivačním mediu. Vzniklé konstrukty obsahovaly izolovaně naklonované geny i plazmidy obsahující oba geny současně. Vyšetřili jsme růstovou křivku kmene DH10B s rekombinantními plazmidy za aerobních a semianaerobních podmínek Za neindukovaných aerobních podmínek roste kmen nesoucí konstrukt s oběma geny rpoN a fhlA výrazně pomaleji než ostatní vzorky. Po indukci arabinózou pozorujeme pomalejší růst u všech kmenů E. coli nesoucí geny rpoN a fhlA a také u kmene nesoucího konstrukt s oběma geny rpoN a fhlA. Protože T. pallidum nelze kultivovat v podmínkách in vitro, expresi treponemálních genů jsme monitorovali v 19 klonech BAC knihovny T. pallidum v E. coli DH10B. Konstrukty s geny rpoN a fhlA byly transformovány do E. coli DH10B s kosmidy DSTP147 a DSTP085. Z těchto kmenů byla izolována RNA 60 a 120 minut po indukci arabinózou a hladina transkriptů vyšetřena kvantitativní RT PCR. Nejvíce jsou regulovány geny TP 9 (tprA), TP 28 (předpovězený gen pro hemolysin), TP 30 (groEL), TP 1037 (hlyIII) a TP 1038 (TpF1). Regulační proteiny RpoN a FhlA přitom spolupracují na pozitivní regulaci transkripce těchto genů.
ER -
ČEJKOVÁ, Darina and David ŠMAJS. Identifikace regulátorů genové exprese u Treponema pallidum. (Identification of gene expression regulators in Treponema pallidum.). In \textit{Sborník příspěvků IX. Pracovního setkání biochemiků a molekulárních biologů}. Brno: Přírodovědecká fakulta MU, 2005, p.~5. ISBN~80-210-3635-4.
|
