DVOŘÁK, Miroslav, Milena MATEJOVIČOVÁ, Iva SLANINOVÁ, Zdenka SLUNSKÁ a Eva TÁBORSKÁ. Genotoxic effect of benzophenathridine alkaloids on human leukemia (HL-60) cells. In Book of abstracts p.72, VI International Comet Assay Workshop, September 22-24 2005. Warszawa, Poland: Neuveden. s. 72. 2005.
Další formáty:   BibTeX LaTeX RIS
Základní údaje
Originální název Genotoxic effect of benzophenathridine alkaloids on human leukemia (HL-60) cells.
Název česky Genotoxický efekt benzophenathridinových alkaloidů na lidské leukemické (HL-60) buňky.
Autoři DVOŘÁK, Miroslav, Milena MATEJOVIČOVÁ, Iva SLANINOVÁ, Zdenka SLUNSKÁ a Eva TÁBORSKÁ.
Vydání Warszawa, Poland, Book of abstracts p.72, VI International Comet Assay Workshop, September 22-24 2005, s. 72-72, 2005.
Nakladatel Neuveden
Další údaje
Originální jazyk angličtina
Typ výsledku Stať ve sborníku
Obor 10600 1.6 Biological sciences
Stát vydavatele Polsko
Utajení není předmětem státního či obchodního tajemství
Organizační jednotka Lékařská fakulta
Klíčová slova anglicky benzo[c]phenanthridine alkaloids; genotoxicity; HL-60 cells; comet assay
Štítky Benzo[c]phenanthridine Alkaloids, comet assay, genotoxicity, HL-60 cells
Změnil Změnil: RNDr. JUDr. Vladimír Šmíd, CSc., učo 1084. Změněno: 27. 4. 2006 19:36.
Anotace
Sanguinarine and chelerythrine are the main alkaloids of benzo[c]phenanthridine group. Many significant biological effects of these compounds have been reported. Information about their cytotoxicity and genotoxicity concerning different cells, tissues and organisms is essential for their further investigation. The aim of the study was to assess a genotoxicity of two benzophenanthridine alkaloids, chelerythrine (CHEL) and sanguinarine (SANG), on the cultured leukemic cells line HL-60. Alkaline neutral modification of the comet assay method was employed. Cells were cultured for different time intervals (1-3 hours) with either CHEL or SANG in concentrations up to 1 mg per ml of culture medium. Hydrogen peroxide (30 uM) served as a positive control. At the end of incubation, cells were transferred into phosphate saline buffer, pH 7.4, and mixed with 0.8 % low melting point agarose. Aliquots of cell suspension were poured on microscopic slides covered with 1% normal agarose and overlaid with a cover glass. Lysis of the cells was carried out for 1 hour in a Tris-borate buffer (TBE), pH 8.4, containing 1mM EDTA and 2.5% SDS. After lysis, slides were placed into denaturating buffer for 20 min, neutralized in the TBE and laid side by side into electrophoresis chamber filled with cold TBE buffer. Electrophoresis has been performed for 15 min at constant 30 V (1 V/cm). Afterwards the slides were fixed and then silver stained. The microscope slides were evaluated under microscope Leitz Orthoplan (objective 16x, magnification 160x) attached to the TV camera or to the CCD camera. Images of the comets were saved in the bmp format and analyzed with suitable PC software. Both the alkaloids seem to have an effect on the cellular DNA in tested concentrations. CHEL at the concentration 10 ug/ml caused practically total damage of the HL-60 nucleoids, when comparing DNA amount in the comet head and tail (about 90 % of comet signal appeared in the tail). This damage is comparable with the damage of the positive control caused by cell culture incubation with 30 uM hydrogen peroxide. Comets in the presence of SANG at the same concentration show about 60% of the nuclear DNA in tails. Our experiments showed, that both studied substances, CHEL and SANG, cause damage to nuclear DNA of HL-60 cells and therefore might be considered to be genotoxic for cultured leukemic HL-60 cells.
Anotace česky
Sanguinarin a chelerythrin jsou hlavní alkaloidy benzo[c]phenanthridinové skupiny. Ukázalo se, že tyto sloučeniny jsou zodpovědné za mnohé biologické efekty. Proto jsou informace o jejich cytotoxicitě a genotoxicitě vzhledem k různým buňkám, tkáním a organismům esenciální pro jejich další výzkum. Cílem této práce bylo zhodnotit genotoxicitu dvou benzophenathridinových alkaloidů, chelerythrinu a sanguinarinu, na kulturách leukemické buněčné linie HL-60. Jako metoda byla aplikována alkalicko-neutrální modifikace analýzy komet.
Návaznosti
GA525/04/0017, projekt VaVNázev: Rostlinné zdroje benzofenanthridinových alkaloidů a účinek těchto alkaloidů na normální a nádorové buňky
Investor: Grantová agentura ČR, Rostlinné zdroje benzofenanthridinových alkaloidů a účinek těchto alkaloidů na normální a nádorové buňky
VytisknoutZobrazeno: 28. 3. 2024 12:23