FLASAROVA, Magdalena, Petra MATĚJKOVÁ, David ŠMAJS, Vladana WOZNICOVÁ and Monika DVOŘÁKOVÁ-HEROLDOVÁ. Detekce Treponema pallidum subsp. pallidum v biologickém materiálu, výhledy pro epidemiologii syfilis (Detection of Treponema pallidum subsp. pallidum in clinical material, epidemiologic consequences). In XXI. Pečenkovy epidemiologické dny. Brno: Konvoj, s.r.o., 2006, p. S1, 1 pp. ISBN 80-7302-114-5.
Other formats:   BibTeX LaTeX RIS
Basic information
Original name Detekce Treponema pallidum subsp. pallidum v biologickém materiálu, výhledy pro epidemiologii syfilis
Name in Czech Detekce Treponema pallidum subsp. pallidum v biologickém materiálu, výhledy pro epidemiologii syfilis
Name (in English) Detection of Treponema pallidum subsp. pallidum in clinical material, epidemiologic consequences
Authors FLASAROVA, Magdalena, Petra MATĚJKOVÁ, David ŠMAJS, Vladana WOZNICOVÁ and Monika DVOŘÁKOVÁ-HEROLDOVÁ.
Edition Brno, XXI. Pečenkovy epidemiologické dny. p. S1, 1 pp. 2006.
Publisher Konvoj, s.r.o.
Other information
Original language Czech
Type of outcome Proceedings paper
Field of Study Genetics and molecular biology
Country of publisher Czech Republic
Confidentiality degree is not subject to a state or trade secret
Organization unit Faculty of Medicine
ISBN 80-7302-114-5
Keywords in English Treponema pallidum subsp. pallidum; detection in the clinical material; molecular typing; mucocutaneous swabs
Tags molecular typing, mucocutaneous swabs, Treponema pallidum subsp. pallidum
Changed by Changed by: prof. MUDr. David Šmajs, Ph.D., učo 1116. Changed: 26/6/2009 16:17.
Abstract
V této práci jsme se zaměřili na molekulárněbiologickou diagnostiku spirochety Treponema pallidum, a to v různém biologickém materiálu. Vyšetřované klinické vzorky pocházely od pacientů ve stádiu primárním, sekundárním, časně latentním a pozdně latentním včetně kongenitální syfilis. Biologické vzorky zahrnovaly kožní a slizniční stěry, plnou krev, séra, krevní sraženiny, likvory a tkáně. Celkem jsme vyšetřili 219 klinických vzorků, z toho 142 sér, 42 stěrů, 32 sraženin, 1 likvor, 1 tkáň a 1 plnou krev. Z tohoto výčtu vzorků jsme nalezli 9 pozitivních stěrů od 6 dospělých pacientů ve stádiu primární a sekundární syfilis. U novorozence s kongenitální syfilis jsme prokázali tyto pozitivní vzorky: 1 likvor, 1 sérum a 1 stěr. U všech vyšetřovaných vzorků jsme provedli detekci treponemální DNA pomocí dvoukrokové (nested) PCR na gen tmpC (TP0319, kódující membránový lipoprotein). PCR produkty (z genu TP0319) o velikosti 451 bp jsme štěpili pomocí 3 restriktáz (Sac I, Nhe I, Dde I), k odlišení jednotlivých kmenů Treponema pallidum. Pro přesnou kmenovou typizaci jsme amplifikovali geny TP0548, TP0136, TP0319 a vzniklé PCR produkty jsme sekvenovali. Výsledky sekvenací ve dvou případech ukázaly výskyt kmene sekvenčně totožného s kmenem SS14 a v dalších dvou případech jsme nalezli sekvenční změny v lokusech TP0548 a TP0136, které prokázaly výskyt unikátních syfilitických kmenů, doposud nepopsaných u Treponema pallidum subsp. pallidum. U jednoho vyšetřovaného novorozence jsme porovnali počet molekul DNA ve 2 různých biologických materiálech (v séru a likvoru). Počty treponemální DNA byly shodné a činily asi 100 000 treponemálních molekul DNA v 1 mikrolitru vzorku. Toto ukazuje na skutečnost, že u kongenitální syfilis je počet mikroorganismů v séru a likvoru srovnatelný a nápadně vyšší než u dospělých pacientů. Molekulárněgenetická detekce syfilis byla u vyšetřovaných dospělých pacientů možná jen u slizničních (faryngeálních a genitálních) stěrů a dále z 1 plné krve. Původce syfilis Treponema pallidum subsp. pallidum nebyl v séru dospělých pacientů detegován. Závěrem lze konstatovat, že molekulární typizace a identifikace jednotlivých kmenů a izolátů T. p. pallidum přispěje zásadně k rozvoji epidemiologie syfilis a přinese i možnost rozlišení mezi reinfekcí a reaktivací syfilitického procesu.
Abstract (in English)
The PCR amplification protocol detecting tmpC gene (TP0319, encoding putative membrane lipoprotein) was used for detection of Treponema pallidum subsp. pallidum in the clinical material. T. p. pallidum DNA was not detected in any of the analyzed sera samples. Out of 11 mucocutaneous swabs (7 genital and 4 pharyngeal ones), 6 from 3 patients with primary or secondary syphilis were positive. In addition, one skin swab was positive in patient with early congenital syphilis. Sera and cerebrospinal fluid samples from this patient were also positive. DNA sequencing of genes TP0136 and TP0548 in the positive samples revealed two patients with DNA sequence identical to T. p. pallidum strain SS14 and two unique, not yet known T. p. pallidum strains. The advances in molecular typing of T. p. pallidum in clinical material will become important for epidemiologic consequences and for clinical discrimination between reinfection and reactivation of the syphilitic process.
Links
GA310/04/0021, research and development projectName: Postgenomické studie syfilitické spirochety Treponema pallidum
Investor: Czech Science Foundation, Postgenomic studies on Treponema pallidum, the syphilis spirochete
MSM0021622415, plan (intention)Name: Molekulární podstata buněčných a tkáňových regulací
Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Molecular basis of cell and tissue regulations
NR8967, research and development projectName: Molekulární typizace kmenů a izolátů Treponema pallidum subsp. pallidum: základ pro epidemiologickou a klinickou identifikaci jednotlivých kmenů
Investor: Ministry of Health of the CR
PrintDisplayed: 19/7/2024 09:15