D 2006

Carboxyl-functionalized magnetic microparticle carrier for isolation and identification of DNA in Dairy products

HORÁK, Daniel, Bohuslav RITTICH and Alena ŠPANOVÁ

Basic information

Original name

Carboxyl-functionalized magnetic microparticle carrier for isolation and identification of DNA in Dairy products

Name in Czech

Využití magnetických mikročástic funkcionalizovaných karboxylovými skupinami k izolaci a a identifikaci DNAv mléčných výrobcích

Authors

HORÁK, Daniel (203 Czech Republic), Bohuslav RITTICH (203 Czech Republic, guarantor) and Alena ŠPANOVÁ (203 Czech Republic)

Edition

Krems, 6th International Conference on the Scietific and Clinical applicationsof magnetic Carriers, p. 17-17, 1 pp. 2006

Publisher

University of applied Sciences Krems, Austria

Other information

Language

English

Type of outcome

Stať ve sborníku

Field of Study

10404 Polymer science

Country of publisher

Austria

Confidentiality degree

není předmětem státního či obchodního tajemství

RIV identification code

RIV/00216224:14310/06:00016317

Organization unit

Faculty of Science

UT WoS

000245524800052

Keywords in English

Magnetic particles; praparation; DNA separation; Lactobacillus; Bifidobacterium; PCR

Tags

International impact
Změněno: 29/3/2007 12:09, doc. Ing. Bohuslav Rittich, CSc.

Abstract

V originále

Magnetite nanoparticles ca. 14 nm in diameter were obtained by chemical coprecipitation of Fe(II) and Fe(III) salts with ammonia in the presence of poly(ethylene glycol) (PEG). Magnetic poly(glycidyl methacrylate) (PGMA) microspheres were prepared by dispersion polymerization in poly(vinylpyrrolidone) (PVP)-stabilized aqueous ethanol with PEG-coated magnetite nanoparticles. Magnetic PGMA microspheres were hydrolyzed and carboxyl groups introduced by oxidation with KMnO4. Such a carrier was used for isolation of DNA. The particles reversibly bound DNA in the presence of high concentration of PEG 6,000 and sodium chloride. Bacterial DNA was isolated from crude cell lysates of different dairy products (butter milk, cheese, yoghurt), probiotic tablets or from cell lyophilisates. The presence of Bifidobacterium and Lactobacillus DNA in samples was identified by PCR amplification.

In Czech

Nanočástice magnetitu o průměru asi 14 nm byly připraveny chemickým srážením Fe(II)a Fe(III)solí amoniakem v přítomnosti poly(ethylen glykolu) (PEG). Magnetické poly(glycidyl methakrylátové) (PGMA) mikročásticebyly připraveny dispersní polymerizací v poly(vinylpyrrolidonu) (PVP), který byl stabilizován vodným roztokem ethanolu s magnetitovými nanočásticemi pokrytými PEG. Magnetické PGMA mičástice byly hydrolyzeovány a zavedeny karboxylové skupiny oxidací s KMnO4. Takto připravené částice byly použity pro izolaci DNA. Částice reversibilně váží DNA in v přítomnosti vysoké koncentrace PEG 6000 a chloridu sodného. Bakteriální DNA byla izolována z hrubých lyzátů buněk z různých mléčných výrobků (podmáslí, sýry, jogurty), probiotických tablet nebo lyofilizovaných buněk. Přítomnost DNA z buněk rodu Bifidobacterium a Lactobacillus ve vzorcích byla identifikována pomocí PCR.

Links

GA203/05/2256, research and development project
Name: Magnetické hydrofilní polymerní mikročástice reagující na vnější stimuly pro lékařství a bioinženýrství
Investor: Czech Science Foundation, Magnetic stimuli-responsive hydrophilic polymer microspheres for biomedicine/bioengineering