MANDÁTOVÁ, Veronika and Pavel HYRŠL. Změny obsahu lysozymu a proteinového spektra hemolymfy zavíječe voskového (Galleria mellonella L.) během vývoje (Lysozyme and protein profile changes in the hemolymph of the wax moth (Galleria mellonella L.) during the development). In Zoologické dny Brno 2007. 2007. ISBN 978-80-903329-7-3.
Other formats:   BibTeX LaTeX RIS
Basic information
Original name Změny obsahu lysozymu a proteinového spektra hemolymfy zavíječe voskového (Galleria mellonella L.) během vývoje
Name in Czech Změny obsahu lysozymu a proteinového spektra hemolymfy zavíječe voskového (Galleria mellonella L.) během vývoje
Name (in English) Lysozyme and protein profile changes in the hemolymph of the wax moth (Galleria mellonella L.) during the development
Authors MANDÁTOVÁ, Veronika and Pavel HYRŠL.
Edition Zoologické dny Brno 2007, 2007.
Other information
Original language Czech
Type of outcome Conference abstract
Field of Study 30105 Physiology
Country of publisher Czech Republic
Confidentiality degree is not subject to a state or trade secret
Organization unit Faculty of Science
ISBN 978-80-903329-7-3
Keywords in English Galleria mellonella; hemolymph; lysozyme; proteins
Tags Galleria mellonella, hemolymph, lysozyme, proteins
Changed by Changed by: doc. RNDr. Pavel Hyršl, Ph.D., učo 9982. Changed: 18/5/2011 10:42.
Abstract
Housenky (larvy) zavíječe voskového (Galleria mellonella L., Lepidoptera, Pyralidae) byly chovány ve tmě při teplotě 30 C na umělé půdě podle Haydaka. Celkový larvální vývoj trvá přibližně 32 dní a dělí se do sedmi instarů. Následuje stádium kukly, ze kterého se líhnou dospělci za 8-10 dní, pouze u kukel lze rozlišit pohlaví. Během vývoje byla sledována biometrická data včetně fotodokumentace. Pro analýzu hemolymfy byly použity vzorky z každého vývojového dne předposledního a posledního (VI. - 3 dny a VII.- 8 dní) larválního instaru a začátek, střed a konec stádia kukly. V nižších instarech nebylo možné odebrat dostatečné množství hemolymfy vzhledem k malé velikosti housenek. Cílem práce bylo porovnat množství lysozymu v hemolymfě a stanovit rozdíly v proteinovém spektru hemolymfy posledních dvou larválních instarů a kukel různého stáří. Koncentrace lysozymu byla stanovena metodou radiální difúze v agaróze využívající bakterii Micrococcus luteus, která je citlivá na působení lysozymu. Průměr difúzní zóny je přímo úměrný bakteriolytické aktivitě vzorku a po přepočtu podle kalibrační křivky je množství lysozymu vyjádřeno v mg/ml hemolymfy. Dále byla odebraná hemolymfa zpracována metodikou SDS-PAGGE (polyakrylamidová gradientová gelová elektroforéza v prostředí dodecylsulfátu sodného). Gely obarvené stříbrem byly vyhodnoceny na videodenzitometru v programu Molecular Analyst. K výrazným změnám v obsahu lysozymu během larválního vývoje nedochází. Jeho množství se pohybuje během celého vývoje kolem 0,4 mg/ml hemolymfy. V pupálním vývoji bylo množství naměřeného lysozymu menší, nejnižší koncentrace lysozymu byla zjištěna na začátku stadia kukly. Směrem ke konci pupálního stadia množství lysozymu rostlo. V proteinovém spektru hemolymfy bylo detekováno 12 dobře rozlišitelných proteinových frakcí. Nejvýrazněji jsou zastoupeny lipophoriny (apolipophorin-I a apolipophorin-III) a zásobní proteiny, jejichž množství (koncentrace) se zvyšuje se stářím larev.
Abstract (in English)
Housenky (larvy) zavíječe voskového (Galleria mellonella L., Lepidoptera, Pyralidae) byly chovány ve tmě při teplotě 30 C na umělé půdě podle Haydaka. Celkový larvální vývoj trvá přibližně 32 dní a dělí se do sedmi instarů. Následuje stádium kukly, ze kterého se líhnou dospělci za 8-10 dní, pouze u kukel lze rozlišit pohlaví. Během vývoje byla sledována biometrická data včetně fotodokumentace. Pro analýzu hemolymfy byly použity vzorky z každého vývojového dne předposledního a posledního (VI. - 3 dny a VII.- 8 dní) larválního instaru a začátek, střed a konec stádia kukly. V nižších instarech nebylo možné odebrat dostatečné množství hemolymfy vzhledem k malé velikosti housenek. Cílem práce bylo porovnat množství lysozymu v hemolymfě a stanovit rozdíly v proteinovém spektru hemolymfy posledních dvou larválních instarů a kukel různého stáří. Koncentrace lysozymu byla stanovena metodou radiální difúze v agaróze využívající bakterii Micrococcus luteus, která je citlivá na působení lysozymu. Průměr difúzní zóny je přímo úměrný bakteriolytické aktivitě vzorku a po přepočtu podle kalibrační křivky je množství lysozymu vyjádřeno v mg/ml hemolymfy. Dále byla odebraná hemolymfa zpracována metodikou SDS-PAGGE (polyakrylamidová gradientová gelová elektroforéza v prostředí dodecylsulfátu sodného). Gely obarvené stříbrem byly vyhodnoceny na videodenzitometru v programu Molecular Analyst. K výrazným změnám v obsahu lysozymu během larválního vývoje nedochází. Jeho množství se pohybuje během celého vývoje kolem 0,4 mg/ml hemolymfy. V pupálním vývoji bylo množství naměřeného lysozymu menší, nejnižší koncentrace lysozymu byla zjištěna na začátku stadia kukly. Směrem ke konci pupálního stadia množství lysozymu rostlo. V proteinovém spektru hemolymfy bylo detekováno 12 dobře rozlišitelných proteinových frakcí. Nejvýrazněji jsou zastoupeny lipophoriny (apolipophorin-I a apolipophorin-III) a zásobní proteiny, jejichž množství (koncentrace) se zvyšuje se stářím larev.
PrintDisplayed: 15/6/2024 12:25