METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS

HAVLIŠ, Jan and Hana OVADOVÁ. METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS. In KANICKÝ, Viktor and Tomáš VACULOVIČ. 13. Spektrometrická konference - sborník. 2007.

Basic information

• Original name: METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS
• Name in Czech: METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS
• Name (in English): METALO + PROTEIN = GE + LA + ICP + MS
• Authors: HAVLIŠ, Jan (203 Czech Republic, guarantor) and Hana OVADOVÁ (203 Czech Republic).
• Edition: 13. Spektrometrická konference - sborník, 2007.

Other information

• Original language: Czech
• Type of outcome: Conference abstract
• Field of Study: 10406 Analytical chemistry
• Country of publisher: Czech Republic
• Confidentiality degree: is not subject to a state or trade secret
• RIV identification code: RIV/00216224:14310/07:00020361
• Organization unit: Faculty of Science
• Keywords in English: metalloprotein; speciation; gel electrophoresis; laser ablation; ICP MS
• Tags: gel electrophoresis, ICP MS, laser ablation, metalloprotein, Speciation
• Tags: International impact

Abstract

Gelová elektroforéza se jako selektivní složka velmi dobře kombinuje s LA-ICP-MS jako citlivou složkou a jinými hmotnostně spektrometrickými technikami v rámci složky strukturní. Byla provedena nativní a denaturující gelová elektroforéza modelového vzorku BSA, který byl saturován ionty Cu(II+), Co(II+). Pro zakoncentrování vzorku bylo použito napětí 100 V po dobu 10 minut a separace trvala 30 minut při 200 V. Gel byl sušen pomocí sušičky gelu (model GD5040). Pro laserovou ablaci separovaných metaloproteinů byl použit nanosekundový Nd:YAG laser (New Wave, USA) pracující při vlnové délce 213 nm s délkou pulzu 4,2 ns a frekvencí 20 Hz. Vzorek vysušeného gelu byl umístěn do ablační cely o objemu 10 cm-3. Nejnižší hodnoty RSD intenzit signálu odpovídaly těm získaným po LA gelu, který byl vizualizován stříbrem. Při optimalizaci podmínek laserové ablace na gelu nasyceném ionty Co(II+) o koncentraci 10-4 mol.l-1 bylo zjištěno vhodné použití hodnot hustoty zářivého výkonu v rozmezí 0,2 GW.cm-2 až 2 GW.cm-2.

Abstract (in English)

Gel electrophoresis (GE), a selective component, is combined effectively with LA-ICP-MS as a sensitive component, and with other mass spectrometric techniques as structural components of metalloprotein associated approach. Native and denaturating GE was done for model sample of BSA saturated with Cu(II+), Co(II+) ions. Sample was preconcetrated for 10 mins at 100 V, separation took 30 mins at 200 V. Gel was then dried in gel drier (model GD5040). A nanosecond Nd:YAG laser (New Wave, USA) working at 213 nm with pulse length 4.2 ns and frequency 20 Hz was used for laser ablation of separated metalloproteins. Dried gel sample was in 10cm-3 ablation cell. Lowest RSD values for signal intensity were obtained with gels stained with silver. During laser ablation optimisation of gel saturated with Co(II+) ions it was found that optimal densities of irradiation output lie between 0.2 GW.cm-2 and 2 GW.cm-2.

Links

• GA203/07/1391, research and development project: Name: Vývoj nových metod pro charakterizaci metaloproteinů

Investor: Czech Science Foundation, Development of new methods for metalloprotein characterisation

• MSM0021622413, plan (intention): Name: Proteiny v metabolismu a při interakci organismů s prostředím

Investor: Ministry of Education, Youth and Sports of the CR, Proteins in metabolism and interaction of organisms with the environment