Other formats:
BibTeX
LaTeX
RIS
@inproceedings{744196, author = {Pekárová, Blanka and Borkovcová, Petra and Brzobohatý, Břetislav and Urbaníková, Ľubica and Hejátko, Jan and Janda, Lubomír}, address = {Olomouc (ČR)}, booktitle = {Bulletin České společnosti experimentální biologie rostlin a Fyziologické sekce Slovenské botanické společnosti}, edition = {1.}, keywords = {cytokinins; histidine kinase; CKI1; receiver domain; purification}, language = {cze}, location = {Olomouc (ČR)}, isbn = {1213-6670}, pages = {64-64}, publisher = {Česká společnost experimentální biologie rostlin}, title = {Purifikace a krystalizace přijímačové domény receptorové histidinkinázy CKI1}, url = {http://rustreg.upol.cz/fyzdny2007}, year = {2007} }
TY - JOUR ID - 744196 AU - Pekárová, Blanka - Borkovcová, Petra - Brzobohatý, Břetislav - Urbaníková, Ľubica - Hejátko, Jan - Janda, Lubomír PY - 2007 TI - Purifikace a krystalizace přijímačové domény receptorové histidinkinázy CKI1 PB - Česká společnost experimentální biologie rostlin CY - Olomouc (ČR) SN - 12136670 KW - cytokinins KW - histidine kinase KW - CKI1 KW - receiver domain KW - purification UR - http://rustreg.upol.cz/fyzdny2007 N2 - Cytokininy patří spolu s auxiny ke klíčovým regulátorům růstu rostlin. Potenciálním regulátorem přenosu cytokininového signálu u Arabidopsis thaliana byla identifikována receptorová histidinkináza CKI1. Tato histidinkináza se skládá z extracelulárně lokalizované, na membráně vázané receptorové domény, z intracelulární histidinkinázové domény a přijímačové domény (RD). Vzhledem k velikosti a různosti domén CKI1 je nutné pro určení struktury tohoto proteinu připravit jednotlivé domény samostatně. RD CKI1 byla klonována do expresního vektoru a exprimována v E. coli. Protein byl purifikován ve dvou krocích (Hi Trap Chelating HP se Zn2+ a Hi Load 16/60 Superdex 75) pomocí FPLC systému. Výtěžnost byla ovlivněna složením pufrů, kdy za použití Tris/HCl pufru bylo získáno ~27 mg proteinu/1L bakteriální kultury a při použití fosfátového pufru klesl výtěžek purifikace na ~19 mg/1L bakteriální kultury. Získaný protein byl homogenní za nativních i denaturačních podmínek na PAGE a jeho čistota byla >95%. Stabilita proteinu byla zvýšena za přítomnosti EDTA. Protein byl použit na krystalizační pokusy a byly získány první krystaly proteinu. V současné době jsou podmínky krystalizace optimalizovány. ER -
PEKÁROVÁ, Blanka, Petra BORKOVCOVÁ, Břetislav BRZOBOHATÝ, Ľubica URBANÍKOVÁ, Jan HEJÁTKO and Lubomír JANDA. Purifikace a krystalizace přijímačové domény receptorové histidinkinázy CKI1 (Purification and crystallization of the receiver domain of the receptor histidine kinaseCKI1). In \textit{Bulletin České společnosti experimentální biologie rostlin a Fyziologické sekce Slovenské botanické společnosti}. 1st ed. Olomouc (ČR): Česká společnost experimentální biologie rostlin, 2007, p.~64. ISBN~1213-6670.
|