V originále
We investigated the effects of endocytosis inhibition on Frizzled4-green fluorescent protein (FZD4-GFP) localization, dishevelled levels and Wnt-3a signalling to beta -catenin. Hyperosmotic sucrose and K+ depletion increased the membrane localization of FZD4-GFP, and in parallel triggered fast (1–2 h) and almost complete (approx. 95%) degradation of endogenous dishevelled, which further prevented canonical signalling by Wnt-3a to beta-catenin. The data provide evidence for a molecular mechanism that could be a basis for a novel negative feedback loop within the Wnt/Frizzled pathway depending on dishevelled degradation.
Česky
Zkoumali jsme vliv inhibice endocytózy na lokalizaci proteinu Frizzled4, na hladinu proteinu Dishevelled a na signálování proteinu Wnt-3a. Inhibice endocytózy, ať už s využitím hyperosmolární sacharózy nebo deplece draslíkových iontů zvýšilo memránovou lokalizaci Frizzled4 a zároveň vyvolalo rychlou (1-2 h) a takřka kompletní (95%) degradaci endogenního Dishevelled, což v důsledku zabránilo přenosu signálu proteinu Wnt-3a k beta-cateninu. Tyto výsledky poskytují důkazy pro existenci molekulárního mechanismu, který může tvořit základ negativní zpětné vazby ve Wnt/Frizzled dráze a který závisí na degradaci Dishevelled.