Inhibitory effect of DIDS, NPPB, and phloretin on intracellular chloride channels

MALEKOVÁ, Lubica, Jana TOMÁŠKOVÁ, Marie NOVÁKOVÁ, Peter ŠTEFÁNIK, Juraj KOPÁČEK, Boris LAKATOŠ, Silvia PASTOREKOVÁ, Olga KRIŽANOVÁ, Albert BREIER a Karol ONDRIAŠ. Inhibitory effect of DIDS, NPPB, and phloretin on intracellular chloride channels. Pflügers Archiv - Eur.J. Physiol. Ulm: Springer, 2007, roč. 455, č. 2, s. 349–357. ISSN 0031-6768.

Základní údaje

• Originální název: Inhibitory effect of DIDS, NPPB, and phloretin on intracellular chloride channels
• Název česky: Inhibiční účinek DIDS, NPPB a phloretinu na nitrobuněčné chloridové kanály
• Autoři: MALEKOVÁ, Lubica (703 Slovensko), Jana TOMÁŠKOVÁ (703 Slovensko), Marie NOVÁKOVÁ (203 Česká republika, garant), Peter ŠTEFÁNIK (703 Slovensko), Juraj KOPÁČEK (703 Slovensko), Boris LAKATOŠ (703 Slovensko), Silvia PASTOREKOVÁ (703 Slovensko), Olga KRIŽANOVÁ (703 Slovensko), Albert BREIER (703 Slovensko) a Karol ONDRIAŠ (703 Slovensko).
• Vydání: Pflügers Archiv - Eur.J. Physiol. Ulm, Springer, 2007, 0031-6768.

Další údaje

• Originální jazyk: angličtina
• Typ výsledku: Článek v odborném periodiku
• Obor: 30105 Physiology
• Stát vydavatele: Německo
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Impakt faktor: Impact factor: 3.842
• Kód RIV: RIV/00216224:14110/07:00032705
• Organizační jednotka: Lékařská fakulta
• UT WoS: 000249972600014
• Klíčová slova anglicky: Mitochondria;cardiac myocytes;chloride channels;chloride conductance;apoptosis;single channel
• Štítky: apoptosis, cardiac myocytes, chloride channels, chloride conductance, mitochondria, single channel
• Příznaky: Mezinárodní význam, Recenzováno

Anotace

We studied the effects of the chloride channel blockers, 5-nitro-2-(phenylpropylamino)-benzoate (NPPB), dihydro-4,4 diisothiocyanostilbene-2,2-disulphonic acid (DIDS), and phloretin on H2O2-induced primary culture cardiomyocyte apoptosis and activity of intracellular chloride channels obtained from rat heart mitochondrial and lysosomal vesicles. The chloride channel blockers (100 micromol/l) inhibited the H2O2-induced cardiomyocytes apoptosis. We characterized the effect of the blockers on single channel properties of the chloride channels derived from the mitochondrial and lysosomal vesicles incorporated into a bilayer lipid membrane. The single chloride channel currents were measured in 250:50 mmol/l KCl cis/trans solutions. NPPB, DIDS, and phloretin inhibited the chloride channels by decreasing the channel open probability in a concentration-dependent manner with EC50 values of 42, 7, and 20 micromol/l, respectively. NPPB and phloretin inhibited the channels conductance and open dwell time, indicating that they could affect the chloride selective filter, pore permeability, and gating mechanism of the chloride channels. DIDS and NPPB inhibited the channels from the other side than bongkrekic acid and carboxyatractyloside. The results may contribute to understand a possible involvement of intracellular chloride channels in apoptosis and cardioprotection.

Anotace česky

Studovali jsme účinky blokátorů chloridových kanálů, 5-nitro-2-(phenylpropylamino)-benzoatu (NPPB), dihydro-4,4 diisothiocyanostilbene-2,2-disulphonic kyseliny(DIDS), and phloretinu na H2O2-indukovanou apoptozu v primární kultuře kardiomyocytů a na aktivitu intracelulárních chloridových kanálů získaných z mitochondriálních a lysosomálních veziklů kardiomyocytů potkana. Blokátory chloridových kanálů (100 micromol/l) inhibovaly H2O2-indukovanou apoptozu kardiomyocytů. Studovali jsme účinek blokátorů na vlastnosti jednotlivého chloridového z kanálu na tomto modelu. Proudy přes jednotlivý kanál byly měřeny v 250:50 mmol/l KCl cis/trans roztocích. NPPB, DIDS, and phloretin inhibovaly chloridové kanály snížením pravděpodobnosti otevření kanálu koncentračně závisle s hodnotou EC50 42, 7, and 20 micromol/l. NPPB a phloretin inhibovaly vedení kanálem. Mohly by zřejmě chloridový selektivní filtr, permeabilitu poru a vrátkovací mechanismus. Naše data by mohla přispět k porozumění možnému zapojení intracelulárních chloridových kanálů do apoptozy a kardioprotekce.