Stanovení chimérismu pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase. Přehled a první vlastní zkušennosti

HORKÝ, Ondřej, Jiří MAYER a Dana DVOŘÁKOVÁ. Stanovení chimérismu pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase. Přehled a první vlastní zkušennosti. Transfúze a hematologie dnes. ČR: Česká lékařská společnost J.E. Purkyně, 2007, roč. 13, č. 2, s. 73-78. ISSN 1213-5763.

Základní údaje

• Originální název: Stanovení chimérismu pomocí polymerázové řetězové reakce v reálném čase. Přehled a první vlastní zkušennosti
• Název anglicky: Quantification of chimerism by real-time polymerase chain reaction. Overview and first own experience
• Autoři: HORKÝ, Ondřej (203 Česká republika, garant), Jiří MAYER (203 Česká republika) a Dana DVOŘÁKOVÁ (203 Česká republika).
• Vydání: Transfúze a hematologie dnes, ČR, Česká lékařská společnost J.E. Purkyně, 2007, 1213-5763.

Další údaje

• Originální jazyk: čeština
• Typ výsledku: Článek v odborném periodiku
• Obor: Genetika a molekulární biologie
• Stát vydavatele: Česká republika
• Utajení: není předmětem státního či obchodního tajemství
• Kód RIV: RIV/00216224:14110/07:00032871
• Organizační jednotka: Lékařská fakulta
• Klíčová slova anglicky: chimerism; microchimerism; real-time PCR; fragment analysis
• Štítky: chimerism, fragment analysis, microchimerism, real-time PCR
• Příznaky: Recenzováno

Anotace

Metoda polymerázové řetězové reakce v reálném čase (RQ-PCR) představuje v současnosti jednu z nejcitlivějších kvantitativních metod stanovení chimérizmu po alogenní transplantaci krvetvorných buněk. Tato metoda je minimálně desetkrát citlivější než běžně používaná metoda fragmentační analýzy (FA) s fluorescenční detekcí. Aplikace metody umožňující stanovení mikrochimérizmu, tj. smíšeného chimérizmu (SC) na hladině menší než 1%, dovoluje zachycení relapsu onemocnění signifikantně dříve a ve větším počtu případů, než je tomu u méně senzitivních metod. U pacientů s náhlým znovuobjevením autologní krvetvorby, odhalilo použití RQ-PCR SC také u předchozích odběrů, pomocí FA již klasifikovaných jako chimérizmus kompletní (KC). Rovněž retrospektivní RQ-PCR analýza vzorků s pozitivní minimální zbytkovou chorobou, dle FA klasifikovaných jako KC, opakovaně potvrdila přítomnost autologní krvetvorby na hladině menší než 1%. Použití metody stanovení chimérizmu s lepší mezí detekce tedy umožňuje dřívější klinickou intervenci, avšak absolutní význam chimérizmu i mikrochimérizmu musí být dále hodnocen.

Anotace anglicky

Real time polymerase chain reaction (RQ-PCR) represents one of the most sensitive methods for quantitative analysis of chimerism. This method is at least ten times more sensitive than commonly performed method of fragment analysis (FA) with fluorescence detection. Application of method that enables detection of microchimerism (mixed chimerism under 1%), can recognize relaps significantly sooner and in more cases than by using less sensitive methods. Performance of RQ-PCR within patients with sudden recurrence of autologous haematopoiesis showed microchimerism also in previous samples, formerly judged according to FA as complete donor chimerism (CDC). Furthermore, retrospective analysis of CDC samples from patient with positive residual disease repeatedly revealed microchimerism. Performance of more sensitive method can significantly contribute to early clinical intervention, nevertheless the predictable value of mixed chimerism and especially microchimerism must be further investigated.

Návaznosti

• MSM0021622430, záměr: Název: Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie

Investor: Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy ČR, Funkční a molekulární charakteristiky nádorových a normálních kmenových buněk - identifikace cílů pro nová terapeutika a terapeutické strategie